Alterações Relacionadas à Idade e ao Gênero na Resposta Total de Antioxidantes e no Stress Oxidativo
Abstrato
Este estudo tem como objetivo medir a resposta antioxidante total (TAR) e peróxidos totais (TP) em pacientes esquizofrênicos utilizando a atividade de redução férrica do plasma (FRAP), e avaliar sua relação com o estresse oxidativo. Analisou-se o efeito da idade, gênero e severidade nos níveis desses oxidantes antioxidantes totais nos sujeitos selecionados. Medimos o potencial antioxidante total do plasma e os peróxidos totais em 60 pacientes esquizofrênicos e em 60 indivíduos controles não esquizofrênicos bem pareados. O estresse oxidativo tem sido implicado para desempenhar um papel importante no envelhecimento. A capacidade antioxidante total / peróxido total das amostras clínicas foi medida usando o método de medição espectrofotométrica mais recente. Os resultados mostraram que o Plasma TAR foi encontrado para ser menor em pacientes com esquizofrenia do que naqueles do grupo controle. Pelo contrário, os pacientes tinham níveis elevados de peróxido no plasma total. Os valores do índice de estresse oxidativo (OSI) dos pacientes foram significativamente maiores que os dos controles (P <0,001). Os níveis de peróxido total foram encontrados significativamente maiores (p <0,01) nos idosos, quando comparados com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. Os valores do índice de estresse oxidativo (OSI) dos pacientes foram significativamente maiores que os dos controles (P <0,001). Os níveis de peróxido total foram encontrados significativamente maiores (p <0,01) nos idosos, quando comparados com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. Os valores do índice de estresse oxidativo (OSI) dos pacientes foram significativamente maiores que os dos controles (P <0,001). Os níveis de peróxido total foram encontrados significativamente maiores (p <0,01) nos idosos, quando comparados com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. em comparação com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. em comparação com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia.Palavras-chaveEsquizofrenia, Sistema de Defesa Antioxidante, Estado antioxidante total, Peróxidos totais, Índice de Estresse Oxidativo.
Como citar este artigo:
UMA DEVI P, DEVIPRIYA D, CHINNASWAMY P. IDADE E GÊNERO MUDANÇAS RELACIONADAS NA RESPOSTA TOTAL DE ANTIOXIDANTES E ESTRESSE OXIDATIVO EM PACIENTES COM ESQUIZOFRENIA. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 fevereiro [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 627-633. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=February&volume=2&issue=1&page=627-633&id=202
Os radicais livres e as espécies reativas de oxigênio exercem vários papéis significativos e diversos nas doenças neurodegenerativas, incluindo a esquizofrenia. O cérebro e o sistema nervoso são particularmente propensos a danos causados pelos radicais livres. Como os lipídios de membrana são muito ricos em ácidos graxos poliinsaturados e áreas do cérebro humano são muito ricas em ferro, esses fatores desempenham um papel essencial na geração de espécies de radicais livres. A capacidade de um tecido ou fluido para tamponar os efeitos de espécies reativas de oxigênio é chamado de capacidade antioxidante total (1) .
Os radicais livres modificam adversamente moléculas biologicamente ativas e células inteiras, e estão implicados em uma variedade de complicações e envelhecimento (2) , (3). O sangue contém muitas moléculas antioxidantes que previnem e / ou inibem as reações nocivas dos radicais livres (4) . As concentrações plasmáticas de antioxidantes podem ser medidas separadamente no laboratório, mas essas medições são demoradas, trabalhosas e dispendiosas. Como os efeitos antioxidantes dos componentes antioxidantes do plasma são aditivos, a medição do potencial antioxidante total (TAOP) reflete o estado antioxidante do plasma. Nós avaliamos o estado antioxidante total do plasma com o ensaio FRAP, como proposto por Benzie IF, Strain JJ, 1996 (5) ; Benzie IF, Strain JJ, 1999 (6). O parâmetro capacidade antioxidante total (TAC) resume a atividade global de antioxidantes não enzimáticos e enzimas antioxidantes. Ele fornece informações sobre os tipos de antioxidantes e suas concentrações, sem a diferenciação qualitativa exata. Nós avaliamos o estado oxidativo total do plasma medindo o nível total de peróxido.
A teoria do radical livre do envelhecimento, propõe que a deterioração dependente da idade na função celular está relacionada ao acúmulo de danos oxidativos moleculares causados por espécies reativas de oxigênio. Essas alterações associadas à idade no status antioxidante também podem contribuir para o aumento do estresse oxidativo no envelhecimento. Diversos estudos exploraram o efeito do envelhecimento na capacidade antioxidante total do plasma e dos tecidos. Eles mostraram reduzida (7) , (8), (9) ou inalterada (10) defesa antioxidante.
Há uma grande quantidade de dados convincentes que demonstram que espécies reativas de oxigênio (EROs) estão envolvidas na iniciação e desenvolvimento de muitas formas diferentes de esquizofrenia. Os níveis de oxidantes e antioxidantes na esquizofrenia foram avaliados. No entanto, medidas de resposta antioxidante total (TAR) e peróxidos totais em pacientes com esquizofrenia em diferentes grupos etários e anormalidades baseadas em gênero não são avaliadas até o momento. Portanto, os objetivos deste estudo foram investigar os níveis plasmáticos de TAR-TP em pacientes esquizofrênicos com diferentes faixas etárias e sexo. Anormalidades baseadas em gravidade também foram investigadas.
Material e métodos
SujeitosO estudo foi conduzido no Departamento de Pós-Graduação e Pesquisa em Bioquímica, Dr.NGPArts e Science College, Coimbatore, durante o mês de setembro de 2004 a junho de 2007. Um total de 60 pacientes esquizofrênicos de 18-65 anos de ambos os sexos ( 30 homens e 30 mulheres), de boa formação sócio-econômica, foram selecionados de Udhayam Mananala Kaapagam, um centro de saúde mental, Coimbatore, Tamilnadu, Índia. Todos eles preencheram os critérios do DSM-IV (Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais-IV) (American Psychiatric Association, 2000) (11)para esquizofrenia. Os indivíduos esquizofrênicos foram divididos em três grupos: (1) pacientes esquizofrênicos com faixa etária entre 15 a 30 anos, (2) esquizofrênicos com faixa etária entre 31 a 45 anos, (2) esquizofrênicos na faixa etária de 46 a 65 anos.
Ao controle:
Sessenta anos de idade e sexo pareados normais saudáveis controles sem história individual e familiar de doença mental, foram recrutados para participar neste estudo. Eles incluíram 30 homens e 30 mulheres. A faixa etária variou de 15 a 65 anos, com média de idade de (28,9 ± 14,1) anos. Ambos os pacientes e controles foram recrutados durante o mesmo período, do distrito de Coimbatore. A correspondência entre os pacientes e controles foi feita de acordo com sexo e idade. Os sujeitos do estudo estavam atualmente dentro das faixas normais em seus exames rotineiros de sangue, urina e fezes, eletrocardiógrafos e radiografias; foram excluídos os distúrbios associados ao coração, cérebro, pulmão, fígado, rim e outros órgãos essenciais.
O projeto e o layout deste projeto foram realizados com a aprovação do Presidente, Centro Médico e Hospitais de Kovai, e a devida permissão foi obtida do conselho de revisão institucional do Kongu mananala Arakkattalai, antes do início dos trabalhos. Consentimento informado e por escrito foi obtido de todos os sujeitos antes do exame
Determinação do total de antioxidante no plasma / Potencial total de peróxido
Medição da resposta total a antioxidantes (TAR):
O TAC do plasma foi medido usando um método de medição colorimétrico automatizado desenvolvido pela Benzie and Tensão e modificado por Erel, 2004 (12). Neste método, o radical hidroxilo, que é o radical biológico mais potente, é produzido. No ensaio, a solução de iões ferrosos, que está presente no Reagente 1, é misturada com peróxido de hidrogénio que está presente no Reagente 2. Os radicais produzidos sequencialmente, como o catião radical de dianisidina de cor castanha, produzido pelo radical hidroxilo, são também radicais potentes . Neste ensaio, mede-se o efeito antioxidante da amostra contra as reacções potentes dos radicais livres, que é iniciada pelo radical hidroxilo produzido. Os resultados do ensaio são expressos em mmol Trolox equivalente / L (6) , (7) , (12)A precisão deste ensaio é excelente. Medições precisas de TAC podem ser obtidas em apenas 10 min, tornando este ensaio, eminentemente adequado para o laboratório de bioquímica clínica (13) .
Medição da Concentração
Total de Peróxido (TP) As concentrações de peróxido total (TP) foram determinadas usando o método FOX2 (14) , com pequenas modificações (13) , (15). O sistema de teste FOX2 é baseado na oxidação do íon ferroso ao íon férrico por vários tipos de peróxidos contidos nas amostras de plasma, para produzir um complexo colorido de férrico-xilenol laranja cuja absorbância pode ser medida. O reagente FOX2 foi preparado dissolvendo sulfato ferroso de amónio (9,8 mg) em H2SO4 250 mM (10 mL), para dar uma concentração final de 250 iM de ião ferroso em ácido. Esta solução foi então adicionada a 90 ml de metanol de qualidade para HPLC contendo 79,2 mg de hidroxitolueno butilado (BHT). Finalmente, 7,6 mg de laranja de xilenol foram adicionados com agitação, para fazer o reagente de trabalho final
Resultados
Um total de 60 pacientes com esquizofrenia e 60 indivíduos sem esquizofrenia foram recrutados. A Tabela 1 ilustra a resposta antioxidante total de indivíduos jovens, adultos e idosos esquizofrênicos. As capacidades antioxidantes totais foram medidas como ensaio de FRAP, e os níveis de peróxidos totais foram medidos pelo método FOX2 no plasma sanguíneo de indivíduos de estudo e controle de diferentes faixas etárias.Na (Tabela / Fig 1), a comparação entre o grupo esquizofrênico e os grupos controle revelou que o nível de TAR foi significativamente menor, e os níveis de TP e IEO foram significativamente maiores em todos os grupos estudados (p <0,01), mas essas mudanças foram estatisticamente mais significativas no estudo grupo com idade acima de 45 anos, ou seja, pacientes idosos (p <0,001). Houve também uma diminuição significativa nos valores do potencial antioxidante total para pacientes esquizofrênicos com faixa etária acima de 45 anos (idosos), em comparação com pacientes esquizofrênicos com idades jovens e adultas, bem como em indivíduos idosos controles.
Houve uma diferença significativa nos níveis de TAR, TP e OSI de indivíduos do sexo masculino e feminino em estudo e controle. (Tabela / Fig 2). Os resultados mostraram que os pacientes do sexo masculino têm mais estresse oxidativo do que os pacientes do sexo feminino. Os resultados mostraram que os pacientes esquizofrênicos crônicos têm mais danos oxidativos do que os pacientes agudos.
Discussão
No presente estudo, descobrimos que o balanço oxidativo / antioxidante mudou para o estado oxidativo, a saber, o aumento do estresse oxidativo estava presente em pacientes idosos com esquizofrenia, em comparação com indivíduos saudáveis de controle.Foi demonstrado que as EROs e outros oxidantes também poderiam ser formados no processo fisiológico normal (17) . As ROS aumentadas, por sua vez, aumentam os produtos LPO e, assim, levam a lesões nos tecidos. H2O2 e outros derivados de peróxidos aumentam em algumas condições e se difundem no plasma. Aqui, os componentes antioxidantes do plasma os dominam e são simultaneamente consumidos (4) .
Quando TP é medido, isso significa que a soma de muitos peróxidos como peróxido de proteína, peróxido lipídico e H2O2, são medidos. Embora se saiba que o H2O2 e os peróxidos lipídicos aumentam na esquizofrenia (1) , (9) , (10) , (18) , (19) , o estresse oxidativo não foi avaliado por meio do TP-TAR na esquizofrenia. Tem sido relatado por Bilal et al (2002) (7) , que o nível de TAR diminui em pacientes com esquizofrenia, e a diminuição dos níveis de antioxidantes no plasma pode estar relacionada à progressão da doença. Foi demonstrado no presente estudo, que o nível de TAR também diminuiu em pacientes com esquizofrenia, em comparação com indivíduos controle.
As possíveis razões para este aumento de TP, pode ser o inevitável aumento de peróxidos lipídicos e ROS, incluindo H2O2 na esquizofrenia. Muitas moléculas antioxidantes encontradas no sangue previnem ou inibem os efeitos nocivos dos radicais livres (4) . Sempre que há diminuição de antioxidantes e / ou aumento de oxidantes, o equilíbrio oxidante / antioxidante é prejudicado em favor dos oxidantes, e isso é conhecido como estresse oxidativo (20) , (21) . Sabe-se que o estresse oxidativo é responsável pela lesão tecidual em muitas doenças e contribui para o desenvolvimento da esquizofrenia.
Verificou-se que a capacidade antioxidante total do plasma sanguíneo depende da idade dos doadores, com os doadores mais velhos apresentando valores de TAC mais baixos (Tabela 1). A contribuição relativa da capacidade antioxidante total ao estresse oxidativo relacionado à idade na esquizofrenia, ainda não está bem definida. Enquanto alguns estudos demonstraram que a capacidade antioxidante do plasma diminui (9) , outros mostraram que ele é inalterado (10) . Nossos dados apoiam a visão de que o envelhecimento está associado à perda da capacidade antioxidante do plasma. Estudos prévios demonstraram baixa capacidade antioxidante na esquizofrenia (18) , (19) , entretanto, o efeito do envelhecimento foi observado apenas por poucos. Nossos resultados são consistentes com os resultados de Yao et al (2001), (22)que hipotetizaram que alterações anormais relacionadas à idade das proteínas antioxidantes plasmáticas foram observadas na esquizofrenia. A diminuição relacionada à idade no estado antioxidante do plasma observada em nosso estudo é consistente com o relatório anterior mostrando a depleção dos principais antioxidantes: vitamina C, alfa-tocoferol, vitamina A, glutationa reduzida (20) e diminuição das atividades de enzimas antioxidantes (23 ) , (24) na esquizofrenia, e fornece a indicação de que esta diminuição pode estar envolvida nos mecanismos de danos induzidos por radicais livres em lipídios, proteínas e DNA durante o envelhecimento.
Bilal et al (2002) (7)relataram uma diminuição nos níveis de TAR em pacientes com esquizofrenia. Da mesma forma, o nível de TAR foi encontrado baixo nos grupos de estudo, no presente estudo. À luz desses dados, uma possível razão para a diminuição do TAR na esquizofrenia pode ser a diminuição de outros antioxidantes como antioxida enzimática e não enzimática.
Conclusão
Com base nos dados apresentados, radicais livres e antioxidantes prejudicados desempenham um papel importante no funcionamento do cérebro e esquizofrenia em pacientes idosos, e os pacientes esquizofrênicos masculinos têm mais estresse oxidativo em comparação com pacientes do sexo feminino e aqueles pertencentes à categoria de jovens e adultos. Até agora, não encontramos a base molecular unívoca da esquizofrenia, que pode ser devida aos radicais livres. No futuro, achamos que esse argumento deve ser confirmado por estudos prospectivos controlados, multicêntricos, que confirmarão os mecanismos exatos do estresse oxidativo em pacientes com diferentes grupos etários de esquizofrenia.Reconhecimento
Os autores agradecem ao Dr. Nalla. G. Palanisamy, MBBS, MD, o presidente, e Dr. Thavamani D.Palanisamy, MBBS, DCH, o secretário, centro médico Kovai e hospitais, e Dr. NGP Arts e Science College, Coimbatore, Índia, para fornecer incentivo e técnicas apoio para realizar este projeto.Referências1.Dusica P., Vesna T. Estresse oxidativo como marcador de sintomas positivos na esquizofrenia. Facta Universitatis. Medicina e Biologia. 2002; 9 (2): 157-161.2.Głód BK, Czapski GA e Haddad PR, Estimativa das propriedades antioxidantes dos ácidos fenilacéticos utilizando cromatografia de exclusão iónica, Acta Chromatographica 2000; 15: 258-68.
3.Tabner BJ, S. Turnbull, OMA El-Agnaf, D. Allsop, Indução do Estresse Oxidativo Celular pelo Péptido -amilóide Envolvido na Doença de Alzheimer. Biol Radical Livre. Med. 2002; 32: 1076.4.Jovem é, Woodside JV. Antioxidantes na saúde e na doença. J Clin Pathol 2001; 54: 176-86.5.Benzie IF, Strain JJ., Ensaio de potencia redutora / antioxidante: medida direta da atividade antioxidante total de fluidos biológicos e versão modificada para medição simultânea do poder antioxidante total e concentração de ácido ascórbico. Métodos Enzymol; 1999; 299: 15–27.6.Benzie IF, Strain JJ. A capacidade de redução férrica do plasma (FRAP) como uma medida de "poder antioxidante": o ensaio FRAP. Anal Biochem, 1996; 239: 70-6.7.Ustundag B, Atmaca M, Kirtas O, Selek S, Metin K e Tezcan E. Resposta antioxidante total em pacientes com esquizofrenia. Psiquiatria e Neurociências Clínicas. 2002; 60: 458-648.Kuloglu Murat, Bilal Ustundag, Murad Atmaca, Halit Canatan, A. Ertan Tezcan, Nadire Cintilinc .. Lipídios por oxidação e níveis de enzimas antioxidantes em pacientes com esquizofrenia e transtorno bipolar. Bioquímica Celular e Função 2002; 20/2: 171 -175.9.Gora Dadheech, Sandhya Mishra, Shiv Gautham, Praveen Sharma ... Estresse oxidativo, alfa-tocoferol. Ácido ascórbico e redução do status de glutationa em esquizofrênicos. Indian J de Clinical Biochemistry 2006; 21 (2): 34-38.10.H Herken, E Uz, H Ozyurt, S Sogut, O Virit, O Akyol. Evidência de que as atividades das enzimas sequestradoras de radicais livres eritrocitárias e os produtos da peroxidação lipídica estão aumentados em diferentes formas de esquizofrenia. Psiquiatria Molecular 2001; 6: 66-73.11.Associação Americana de Psiquiatria, Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais, 2000 (DSM-IV- Association, 2000).
12.
Este estudo tem como objetivo medir a resposta antioxidante total (TAR) e peróxidos totais (TP) em pacientes esquizofrênicos utilizando a atividade de redução férrica do plasma (FRAP), e avaliar sua relação com o estresse oxidativo. Analisou-se o efeito da idade, gênero e severidade nos níveis desses oxidantes antioxidantes totais nos sujeitos selecionados. Medimos o potencial antioxidante total do plasma e os peróxidos totais em 60 pacientes esquizofrênicos e em 60 indivíduos controles não esquizofrênicos bem pareados. O estresse oxidativo tem sido implicado para desempenhar um papel importante no envelhecimento. A capacidade antioxidante total / peróxido total das amostras clínicas foi medida usando o método de medição espectrofotométrica mais recente. Os resultados mostraram que o Plasma TAR foi encontrado para ser menor em pacientes com esquizofrenia do que naqueles do grupo controle. Pelo contrário, os pacientes tinham níveis elevados de peróxido no plasma total. Os valores do índice de estresse oxidativo (OSI) dos pacientes foram significativamente maiores que os dos controles (P <0,001). Os níveis de peróxido total foram encontrados significativamente maiores (p <0,01) nos idosos, quando comparados com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. Os valores do índice de estresse oxidativo (OSI) dos pacientes foram significativamente maiores que os dos controles (P <0,001). Os níveis de peróxido total foram encontrados significativamente maiores (p <0,01) nos idosos, quando comparados com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. Os valores do índice de estresse oxidativo (OSI) dos pacientes foram significativamente maiores que os dos controles (P <0,001). Os níveis de peróxido total foram encontrados significativamente maiores (p <0,01) nos idosos, quando comparados com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. em comparação com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia. em comparação com a população jovem e adulta; além disso, o TAR foi maior em jovens e adultos do que em idosos (p <0,001). Também encontramos mais estresse oxidativo em homens esquizofrênicos do que em mulheres esquizofrênicas (P> 0,01). Este estudo indica que a esquizofrenia está associada com o aumento do estresse oxidativo e do status antioxidante depletado em pessoas idosas, e a utilidade clínica dos antioxidantes precisa ser melhor avaliada em pacientes com esquizofrenia.Palavras-chaveEsquizofrenia, Sistema de Defesa Antioxidante, Estado antioxidante total, Peróxidos totais, Índice de Estresse Oxidativo.Como citar este artigo:
UMA DEVI P, DEVIPRIYA D, CHINNASWAMY P. IDADE E GÊNERO MUDANÇAS RELACIONADAS NA RESPOSTA TOTAL DE ANTIOXIDANTES E ESTRESSE OXIDATIVO EM PACIENTES COM ESQUIZOFRENIA. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 fevereiro [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 627-633. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=February&volume=2&issue=1&page=627-633&id=202
Os radicais livres e as espécies reativas de oxigênio exercem vários papéis significativos e diversos nas doenças neurodegenerativas, incluindo a esquizofrenia. O cérebro e o sistema nervoso são particularmente propensos a danos causados pelos radicais livres. Como os lipídios de membrana são muito ricos em ácidos graxos poliinsaturados e áreas do cérebro humano são muito ricas em ferro, esses fatores desempenham um papel essencial na geração de espécies de radicais livres. A capacidade de um tecido ou fluido para tamponar os efeitos de espécies reativas de oxigênio é chamado de capacidade antioxidante total (1) .Os radicais livres modificam adversamente moléculas biologicamente ativas e células inteiras, e estão implicados em uma variedade de complicações e envelhecimento (2) , (3). O sangue contém muitas moléculas antioxidantes que previnem e / ou inibem as reações nocivas dos radicais livres (4) . As concentrações plasmáticas de antioxidantes podem ser medidas separadamente no laboratório, mas essas medições são demoradas, trabalhosas e dispendiosas. Como os efeitos antioxidantes dos componentes antioxidantes do plasma são aditivos, a medição do potencial antioxidante total (TAOP) reflete o estado antioxidante do plasma. Nós avaliamos o estado antioxidante total do plasma com o ensaio FRAP, como proposto por Benzie IF, Strain JJ, 1996 (5) ; Benzie IF, Strain JJ, 1999 (6). O parâmetro capacidade antioxidante total (TAC) resume a atividade global de antioxidantes não enzimáticos e enzimas antioxidantes. Ele fornece informações sobre os tipos de antioxidantes e suas concentrações, sem a diferenciação qualitativa exata. Nós avaliamos o estado oxidativo total do plasma medindo o nível total de peróxido.
A teoria do radical livre do envelhecimento, propõe que a deterioração dependente da idade na função celular está relacionada ao acúmulo de danos oxidativos moleculares causados por espécies reativas de oxigênio. Essas alterações associadas à idade no status antioxidante também podem contribuir para o aumento do estresse oxidativo no envelhecimento. Diversos estudos exploraram o efeito do envelhecimento na capacidade antioxidante total do plasma e dos tecidos. Eles mostraram reduzida (7) , (8), (9) ou inalterada (10) defesa antioxidante.
Há uma grande quantidade de dados convincentes que demonstram que espécies reativas de oxigênio (EROs) estão envolvidas na iniciação e desenvolvimento de muitas formas diferentes de esquizofrenia. Os níveis de oxidantes e antioxidantes na esquizofrenia foram avaliados. No entanto, medidas de resposta antioxidante total (TAR) e peróxidos totais em pacientes com esquizofrenia em diferentes grupos etários e anormalidades baseadas em gênero não são avaliadas até o momento. Portanto, os objetivos deste estudo foram investigar os níveis plasmáticos de TAR-TP em pacientes esquizofrênicos com diferentes faixas etárias e sexo. Anormalidades baseadas em gravidade também foram investigadas.
Material e métodos
SujeitosO estudo foi conduzido no Departamento de Pós-Graduação e Pesquisa em Bioquímica, Dr.NGPArts e Science College, Coimbatore, durante o mês de setembro de 2004 a junho de 2007. Um total de 60 pacientes esquizofrênicos de 18-65 anos de ambos os sexos ( 30 homens e 30 mulheres), de boa formação sócio-econômica, foram selecionados de Udhayam Mananala Kaapagam, um centro de saúde mental, Coimbatore, Tamilnadu, Índia. Todos eles preencheram os critérios do DSM-IV (Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais-IV) (American Psychiatric Association, 2000) (11)para esquizofrenia. Os indivíduos esquizofrênicos foram divididos em três grupos: (1) pacientes esquizofrênicos com faixa etária entre 15 a 30 anos, (2) esquizofrênicos com faixa etária entre 31 a 45 anos, (2) esquizofrênicos na faixa etária de 46 a 65 anos.Ao controle:
Sessenta anos de idade e sexo pareados normais saudáveis controles sem história individual e familiar de doença mental, foram recrutados para participar neste estudo. Eles incluíram 30 homens e 30 mulheres. A faixa etária variou de 15 a 65 anos, com média de idade de (28,9 ± 14,1) anos. Ambos os pacientes e controles foram recrutados durante o mesmo período, do distrito de Coimbatore. A correspondência entre os pacientes e controles foi feita de acordo com sexo e idade. Os sujeitos do estudo estavam atualmente dentro das faixas normais em seus exames rotineiros de sangue, urina e fezes, eletrocardiógrafos e radiografias; foram excluídos os distúrbios associados ao coração, cérebro, pulmão, fígado, rim e outros órgãos essenciais.
O projeto e o layout deste projeto foram realizados com a aprovação do Presidente, Centro Médico e Hospitais de Kovai, e a devida permissão foi obtida do conselho de revisão institucional do Kongu mananala Arakkattalai, antes do início dos trabalhos. Consentimento informado e por escrito foi obtido de todos os sujeitos antes do exame
Determinação do total de antioxidante no plasma / Potencial total de peróxido
Medição da resposta total a antioxidantes (TAR):
O TAC do plasma foi medido usando um método de medição colorimétrico automatizado desenvolvido pela Benzie and Tensão e modificado por Erel, 2004 (12). Neste método, o radical hidroxilo, que é o radical biológico mais potente, é produzido. No ensaio, a solução de iões ferrosos, que está presente no Reagente 1, é misturada com peróxido de hidrogénio que está presente no Reagente 2. Os radicais produzidos sequencialmente, como o catião radical de dianisidina de cor castanha, produzido pelo radical hidroxilo, são também radicais potentes . Neste ensaio, mede-se o efeito antioxidante da amostra contra as reacções potentes dos radicais livres, que é iniciada pelo radical hidroxilo produzido. Os resultados do ensaio são expressos em mmol Trolox equivalente / L (6) , (7) , (12)A precisão deste ensaio é excelente. Medições precisas de TAC podem ser obtidas em apenas 10 min, tornando este ensaio, eminentemente adequado para o laboratório de bioquímica clínica (13) .
Medição da Concentração
Total de Peróxido (TP) As concentrações de peróxido total (TP) foram determinadas usando o método FOX2 (14) , com pequenas modificações (13) , (15). O sistema de teste FOX2 é baseado na oxidação do íon ferroso ao íon férrico por vários tipos de peróxidos contidos nas amostras de plasma, para produzir um complexo colorido de férrico-xilenol laranja cuja absorbância pode ser medida. O reagente FOX2 foi preparado dissolvendo sulfato ferroso de amónio (9,8 mg) em H2SO4 250 mM (10 mL), para dar uma concentração final de 250 iM de ião ferroso em ácido. Esta solução foi então adicionada a 90 ml de metanol de qualidade para HPLC contendo 79,2 mg de hidroxitolueno butilado (BHT). Finalmente, 7,6 mg de laranja de xilenol foram adicionados com agitação, para fazer o reagente de trabalho final
Resultados
Um total de 60 pacientes com esquizofrenia e 60 indivíduos sem esquizofrenia foram recrutados. A Tabela 1 ilustra a resposta antioxidante total de indivíduos jovens, adultos e idosos esquizofrênicos. As capacidades antioxidantes totais foram medidas como ensaio de FRAP, e os níveis de peróxidos totais foram medidos pelo método FOX2 no plasma sanguíneo de indivíduos de estudo e controle de diferentes faixas etárias.Na (Tabela / Fig 1), a comparação entre o grupo esquizofrênico e os grupos controle revelou que o nível de TAR foi significativamente menor, e os níveis de TP e IEO foram significativamente maiores em todos os grupos estudados (p <0,01), mas essas mudanças foram estatisticamente mais significativas no estudo grupo com idade acima de 45 anos, ou seja, pacientes idosos (p <0,001). Houve também uma diminuição significativa nos valores do potencial antioxidante total para pacientes esquizofrênicos com faixa etária acima de 45 anos (idosos), em comparação com pacientes esquizofrênicos com idades jovens e adultas, bem como em indivíduos idosos controles.Houve uma diferença significativa nos níveis de TAR, TP e OSI de indivíduos do sexo masculino e feminino em estudo e controle. (Tabela / Fig 2). Os resultados mostraram que os pacientes do sexo masculino têm mais estresse oxidativo do que os pacientes do sexo feminino. Os resultados mostraram que os pacientes esquizofrênicos crônicos têm mais danos oxidativos do que os pacientes agudos.
Discussão
No presente estudo, descobrimos que o balanço oxidativo / antioxidante mudou para o estado oxidativo, a saber, o aumento do estresse oxidativo estava presente em pacientes idosos com esquizofrenia, em comparação com indivíduos saudáveis de controle.Foi demonstrado que as EROs e outros oxidantes também poderiam ser formados no processo fisiológico normal (17) . As ROS aumentadas, por sua vez, aumentam os produtos LPO e, assim, levam a lesões nos tecidos. H2O2 e outros derivados de peróxidos aumentam em algumas condições e se difundem no plasma. Aqui, os componentes antioxidantes do plasma os dominam e são simultaneamente consumidos (4) .Quando TP é medido, isso significa que a soma de muitos peróxidos como peróxido de proteína, peróxido lipídico e H2O2, são medidos. Embora se saiba que o H2O2 e os peróxidos lipídicos aumentam na esquizofrenia (1) , (9) , (10) , (18) , (19) , o estresse oxidativo não foi avaliado por meio do TP-TAR na esquizofrenia. Tem sido relatado por Bilal et al (2002) (7) , que o nível de TAR diminui em pacientes com esquizofrenia, e a diminuição dos níveis de antioxidantes no plasma pode estar relacionada à progressão da doença. Foi demonstrado no presente estudo, que o nível de TAR também diminuiu em pacientes com esquizofrenia, em comparação com indivíduos controle.
As possíveis razões para este aumento de TP, pode ser o inevitável aumento de peróxidos lipídicos e ROS, incluindo H2O2 na esquizofrenia. Muitas moléculas antioxidantes encontradas no sangue previnem ou inibem os efeitos nocivos dos radicais livres (4) . Sempre que há diminuição de antioxidantes e / ou aumento de oxidantes, o equilíbrio oxidante / antioxidante é prejudicado em favor dos oxidantes, e isso é conhecido como estresse oxidativo (20) , (21) . Sabe-se que o estresse oxidativo é responsável pela lesão tecidual em muitas doenças e contribui para o desenvolvimento da esquizofrenia.
Verificou-se que a capacidade antioxidante total do plasma sanguíneo depende da idade dos doadores, com os doadores mais velhos apresentando valores de TAC mais baixos (Tabela 1). A contribuição relativa da capacidade antioxidante total ao estresse oxidativo relacionado à idade na esquizofrenia, ainda não está bem definida. Enquanto alguns estudos demonstraram que a capacidade antioxidante do plasma diminui (9) , outros mostraram que ele é inalterado (10) . Nossos dados apoiam a visão de que o envelhecimento está associado à perda da capacidade antioxidante do plasma. Estudos prévios demonstraram baixa capacidade antioxidante na esquizofrenia (18) , (19) , entretanto, o efeito do envelhecimento foi observado apenas por poucos. Nossos resultados são consistentes com os resultados de Yao et al (2001), (22)que hipotetizaram que alterações anormais relacionadas à idade das proteínas antioxidantes plasmáticas foram observadas na esquizofrenia. A diminuição relacionada à idade no estado antioxidante do plasma observada em nosso estudo é consistente com o relatório anterior mostrando a depleção dos principais antioxidantes: vitamina C, alfa-tocoferol, vitamina A, glutationa reduzida (20) e diminuição das atividades de enzimas antioxidantes (23 ) , (24) na esquizofrenia, e fornece a indicação de que esta diminuição pode estar envolvida nos mecanismos de danos induzidos por radicais livres em lipídios, proteínas e DNA durante o envelhecimento.
Bilal et al (2002) (7)relataram uma diminuição nos níveis de TAR em pacientes com esquizofrenia. Da mesma forma, o nível de TAR foi encontrado baixo nos grupos de estudo, no presente estudo. À luz desses dados, uma possível razão para a diminuição do TAR na esquizofrenia pode ser a diminuição de outros antioxidantes como antioxida enzimática e não enzimática.
Conclusão
Com base nos dados apresentados, radicais livres e antioxidantes prejudicados desempenham um papel importante no funcionamento do cérebro e esquizofrenia em pacientes idosos, e os pacientes esquizofrênicos masculinos têm mais estresse oxidativo em comparação com pacientes do sexo feminino e aqueles pertencentes à categoria de jovens e adultos. Até agora, não encontramos a base molecular unívoca da esquizofrenia, que pode ser devida aos radicais livres. No futuro, achamos que esse argumento deve ser confirmado por estudos prospectivos controlados, multicêntricos, que confirmarão os mecanismos exatos do estresse oxidativo em pacientes com diferentes grupos etários de esquizofrenia.ReconhecimentoOs autores agradecem ao Dr. Nalla. G. Palanisamy, MBBS, MD, o presidente, e Dr. Thavamani D.Palanisamy, MBBS, DCH, o secretário, centro médico Kovai e hospitais, e Dr. NGP Arts e Science College, Coimbatore, Índia, para fornecer incentivo e técnicas apoio para realizar este projeto.Referências1.Dusica P., Vesna T. Estresse oxidativo como marcador de sintomas positivos na esquizofrenia. Facta Universitatis. Medicina e Biologia. 2002; 9 (2): 157-161.2.Głód BK, Czapski GA e Haddad PR, Estimativa das propriedades antioxidantes dos ácidos fenilacéticos utilizando cromatografia de exclusão iónica, Acta Chromatographica 2000; 15: 258-68.3.Tabner BJ, S. Turnbull, OMA El-Agnaf, D. Allsop, Indução do Estresse Oxidativo Celular pelo Péptido -amilóide Envolvido na Doença de Alzheimer. Biol Radical Livre. Med. 2002; 32: 1076.4.Jovem é, Woodside JV. Antioxidantes na saúde e na doença. J Clin Pathol 2001; 54: 176-86.5.Benzie IF, Strain JJ., Ensaio de potencia redutora / antioxidante: medida direta da atividade antioxidante total de fluidos biológicos e versão modificada para medição simultânea do poder antioxidante total e concentração de ácido ascórbico. Métodos Enzymol; 1999; 299: 15–27.6.Benzie IF, Strain JJ. A capacidade de redução férrica do plasma (FRAP) como uma medida de "poder antioxidante": o ensaio FRAP. Anal Biochem, 1996; 239: 70-6.7.Ustundag B, Atmaca M, Kirtas O, Selek S, Metin K e Tezcan E. Resposta antioxidante total em pacientes com esquizofrenia. Psiquiatria e Neurociências Clínicas. 2002; 60: 458-648.Kuloglu Murat, Bilal Ustundag, Murad Atmaca, Halit Canatan, A. Ertan Tezcan, Nadire Cintilinc .. Lipídios por oxidação e níveis de enzimas antioxidantes em pacientes com esquizofrenia e transtorno bipolar. Bioquímica Celular e Função 2002; 20/2: 171 -175.9.Gora Dadheech, Sandhya Mishra, Shiv Gautham, Praveen Sharma ... Estresse oxidativo, alfa-tocoferol. Ácido ascórbico e redução do status de glutationa em esquizofrênicos. Indian J de Clinical Biochemistry 2006; 21 (2): 34-38.10.H Herken, E Uz, H Ozyurt, S Sogut, O Virit, O Akyol. Evidência de que as atividades das enzimas sequestradoras de radicais livres eritrocitárias e os produtos da peroxidação lipídica estão aumentados em diferentes formas de esquizofrenia. Psiquiatria Molecular 2001; 6: 66-73.11.Associação Americana de Psiquiatria, Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais, 2000 (DSM-IV- Association, 2000).
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