Efeito do extrato de frutas aquosas de Emblica Officinalis na catalepsia induzida por haloperidol em
Professor, ** PG Sudent, *** Assc.Prof., **** Professor e Chefe, Departamento de Farmacologia, Kasturba Medical College, MANGALORE-575 001, Karnataka, ÍNDIA.
Endereço para correspondência :
Sudhakar Pemminati (Ph.D), Docente,
Departamento de Farmacologia, Faculdade de Medicina de Kasturba,
MANGALORE - 575 001 Ph No.:0824 -2423452 Ext. 5568.
E-mail: pemmineti@yahoo.com
Abstrato
Os f�macos neurol�ticos utilizados no tratamento da esquizofrenia e outros dist�bios afectivos s� conhecidos por produzir efeitos colaterais extrapiramidais. A catalepsia foi induzida por estes fármacos em animais e estes foram utilizados como modelos para os efeitos colaterais extrapiramidais associados aos agentes antipsicóticos em seres humanos. No presente estudo, nós tentamos avaliar o efeito protetor do extrato aquoso dos frutos de Emblica officinalis (EO) na catalepsia induzida por haloperidol (1,0mg / kg intraperitoneal) em camundongos empregando o teste padrão de bar. Os ratos foram alocados em sete grupos, cada grupo contendo seis animais. Os efeitos da droga testada EO (0,8, 2,0 e 4,0mg / kg doses) e as drogas padrão escopolamina (1,0mg / kg) e ondansetron (0,5 e 1. Doses de 0 mg / kg) foram avaliadas após administração única e repetida da dose durante sete dias, 30 minutos antes do haloperidol. Os ratos foram sacrificados no sétimo dia e a atividade da superóxido dismutase (SOD) no tecido cerebral foi estimada usando o método de Beauchamp e Fridovich. Uma redução significativa (P <0,001) nos escores catalépticos foi observada em todos os grupos tratados com drogas de teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose de 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. Os ratos foram sacrificados no sétimo dia e a atividade da superóxido dismutase (SOD) no tecido cerebral foi estimada usando o método de Beauchamp e Fridovich. Uma redução significativa (P <0,001) nos escores catalépticos foi observada em todos os grupos tratados com drogas de teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose de 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. Os ratos foram sacrificados no sétimo dia e a atividade da superóxido dismutase (SOD) no tecido cerebral foi estimada usando o método de Beauchamp e Fridovich. Uma redução significativa (P <0,001) nos escores catalépticos foi observada em todos os grupos tratados com drogas de teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose de 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. 001) observou-se redução nos escores catalépticos em todos os grupos tratados com droga teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. 001) observou-se redução nos escores catalépticos em todos os grupos tratados com droga teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas.
Palavras-chave
Emblica officinalis, haloperidol, catalepsia
Como citar este artigo:
SUDHAKAR PEMMINATI, V NAIR, DORABABU P, GOPALAKRISHNA HN, PAI MRSM. EFEITO DO EXTRATO DE FRUTAS AQUOSAS DE EMBLICA OFFICINALIS SOBRE A CATALEPSIA INDUZIDA POR HALOPERIDOL EM CAMUNDONGOS ALBINO. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2009 agosto [citado: 2018 29 de agosto]; 3: 1657-1662. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2009&month=August&volume=3&issue=4&page=1657-1662&id=552
Introdução Osneurolépticos comumente usados no tratamento da esquizofrenia e de outros transtornos afetivos (1) são frequentemente associados a efeitos colaterais extrapiramidais angustiantes [2,3]. O fenômeno da imobilidade cataléptica induzida em roedores por neurolépticos típicos (por exemplo, haloperidol) é um modelo comportamental robusto para estudar a função nigrostriatal e sua modulação por sistemas colinérgicos, 5-hidroxitriptamina (5-HT, serotoninérgicos), nitrérgicos e outros neurotransmissores [4 5]. A catalepsia induzida por haloperidol (HIC) ocorre devido ao bloqueio dos receptores de dopamina (D2) e à redução da transmissão dopaminérgica (6).. A estimulação aumentada do sistema colinérgico central intrínseco também tem sido implicada na catalepsia induzida pelo haloperidol, uma vez que tem sido relatada a sua intensificação e antagonização por agonistas colinérgicos e pelo bloqueador, atropina, respectivamente (7) . Evidências também sugerem que o sistema serotoninérgico central modula a transmissão dopaminérgica nigrostriatal e os antagonistas de 5-HT3 são relatados para aliviar a catalepsia induzida por neurolépticos (4) . Assim, a escopolamina (um agente anticolinérgico conhecido) e o ondansetron (um conhecido antagonista de 5-HT3) foram utilizados como fármacos padrão neste estudo para comparar o efeito anticatalético do composto de teste, EO.
Emblica officinalis Gaertn. ( Phyllanthus emblicaL.) pertence à família Euphorbiaceae, popularmente conhecida como Amla, que é um remédio familiar comum que encontra seu uso no sistema indígena indiano de medicina contra várias doenças. Tem sido relatado que seus frutos possuem atividades expectorante, purgativa, espasmolítica, antibacteriana, hipoglicêmica (8) , hepatoprotetora (9) e hipolipidêmica (10) . O extrato aquoso dos frutos de OE tem atividade citoprotetora contra a toxicidade induzida por radiação e metais pesados (11) . Também antagoniza as contrações induzidas por serotonina e acetilcolina do útero de rato estrogênio (12). Estas propriedades anticolinérgicas e antiserotonérgicas são importantes para o tratamento da catalepsia induzida por neurolépticos. As frutas EO contêm principalmente taninos e substâncias semelhantes à vitamina C em abundância e seus constituintes químicos incluem ácido gálico, ácido elágico, emblicanina A e B, punigluconina e alguns 10-12 flavanóides (13) . O extrato aquoso dos frutos de EO contém 30,0% de taninos e 10,0% de ácido gálico (a estimativa e a pureza do princípio ativo foram realizadas pelo Laboratório de Controle de Qualidade, M / s. Natural Remedies, Bangalore, laboratório nº0505211, dt.31- 05-2005). Estudos recentes sobre propriedade antioxiadante de frutos OE em cérebro de ratos; aumentando a superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPX) no cérebro de ratos; córtex frontal e estriado, concomitante com redução na peroxidação lipídica (LPO)(14) .
Em nosso laboratório, relatamos a atividade anticatalética de NR-ANX-C (um produto polialbárico) na catalepsia induzida por haloperidol em camundongos (15) . Emblica officinalis é um dos componentes do NR-ANX-C. A evidência das propriedades anticolinérgicas, antiserotonérgicas e antioxidantes do EO levou-nos a avaliar sua atividade anti-cataléptica.
Material e métodos
AnimaisCamundongos albinos machos adultos (pesando 25-30g), criados no biotério central do Kasturba Medical College, Mangalore, foram usados para o estudo. Os animais foram alojados sob ciclos padrão de 12 h: 12 h de luz / escuridão e foram fornecidos com comida e água ad libitum . Os animais foram aclimatados a condições de laboratório antes do teste. Cada animal foi usado uma vez. As experiências foram realizadas entre as 10:00 e as 16:00 horas. O protocolo experimental foi aprovado pelo Institutional Animal Ethics Committee e o estudo foi conduzido de acordo com as Diretrizes da Indian National Science Academy para o uso e cuidado de animais experimentais.
Drogas e Dosagem
A droga de teste: o extrato aquoso dos frutos de Emblica officinalis(pó seco fornecido por Natural Remedies Pvt. Ltd., Bangalore). Os frutos frescos de OE foram coletados localmente após a devida identificação, foram secos ao ar, em pó e extraídos com água bidestilada. O extracto assim obtido foi evaporado em vácuo para se transformar em pó para ser redissolvido em água bidestilada. É um pó castanho a castanho muito escuro com um odor e sabor característicos e foi armazenado em recipientes hermeticamente fechados, protegidos da luz. A análise fitoquímica foi feita para taninos totais por um espectrofotômetro e o ácido gálico foi testado por HPLC.
Os fármacos padrão, escopolamina (German Remedies Ltd., Mumbai) e ondansetron (Cipla Ltd., Mumbai) foram suspensos / dissolvidos em solução de goma arábica a 1% enquanto o haloperidol (RPG Life Sciences Ltd., Bombaim) foi dissolvido em água destilada. Os tratamentos recebidos por cada grupo (cada grupo consiste em seis animais, n = 6) são mostrados na Tabela 1 e 2. O grupo recebeu 1% goma de acácia (10ml / kg) servido como controle. 1% de goma arábica, escopolamina (1,0mg / kg), ondansetron (0,5 e 1,0mg / kg) e OE (0,8, 2,0 e 4,0mg / kg) foram administrados por via oral, enquanto o haloperidol foi administrado intraperitonealmente.
Design experimental
Catalepsia Induzida por Haloperidol (HIC): A catalepsia foi induzida com haloperidol (1,0mg / kg ip) e foi avaliada em intervalos de 30 minutos até 120 minutos e ao final de 240 minutos por meio de um teste padrão de bar [16,17]. O haloperidol (1mg / kg ip) foi escolhido para que pudesse eliciar e, assim, possibilitar a detecção de atenuação ou potenciação do fenômeno (6).. A catalepsia foi avaliada em termos do tempo durante o qual o camundongo manteve uma posição imposta com ambos os membros dianteiros estendidos e apoiados em uma barra de madeira de 4 cm de altura (1,0 cm de diâmetro). O ponto final da catalepsia foi considerado quando ambas as patas dianteiras foram removidas da barra ou se o animal moveu a cabeça de forma exploratória. Um tempo de corte de 1100 segundos foi aplicado. Entre as determinações, os animais foram devolvidos às suas gaiolas individuais. Todas as observações foram feitas entre as 10:00 e as 16:00 horas, numa sala silenciosa, a 23-25º C.
Método de pontuação
Se o animal mantivesse a postura imposta por pelo menos 20 segundos, seria considerado cataléptico e receberia um ponto. Para cada 20 segundos adicionais para os quais a postura cataléptica foi mantida, um ponto extra seria dado. Os animais foram testados duas vezes em intervalos de 30 minutos e apenas a maior duração de imobilidade foi considerada (16) .
No estudo agudo, EO, escopolamina e ondansetrona foram administrados apenas 30 minutos antes da administração do haloperidol. No estudo crônico, essas drogas foram administradas uma vez ao dia, 30 minutos antes da administração do haloperidol por sete dias. A catalepsia foi determinada 30 min após a administração de haloperidol no primeiro e no sétimo dia de tratamento. Os animais foram então sacrificados por deslocamento cervical e a atividade da SOD de todo o tecido cerebral foi estimada pelo método de Beauchamp e Fridovich (18) .
Ensaio de SOD
O ensaio de SOD foi realizado, baseado na inibição, mediada pela SOD, da redução do nitroazul de tetrazólio à formação de azul por ânions de superóxido, como descrito por Beauchamp e Fridovich. A proteína total presente no homogenato foi estimada seguindo o método descrito por Lowry et al. (19) . As unidades de actividade de SOD determinadas, foram expressas em termos de miligramas de proteína total (TP). Os cérebros isolados dos grupos individuais de ratinhos foram homogeneizados (20% p / v) em tampão fosfato 10 mM pH 7,8. O homogenato foi submetido a centrifuga�o. Alíquota de 0,1 ml do homogeneizado (diluição 1:10) foi usada para o ensaio.
Análise estatística
Para cada grupo, a média ± SEM foi calculada e os dados foram analisados> por ANOVA de uma via, seguido pelo teste de Comparação Múltipla de Dunnet. Valores de p <0,05 foram considerados estatisticamente significantes.
Resultados
Estudo agudo (Tabela / Fig. 1)Na fase aguda do estudo, ao final de 30 minutos, não houve diminuição significativa nos escores catalépticos com os medicamentos padrão e o medicamento de teste. No entanto, a partir de 60 minutos após a administração de haloperidol, escopolamina (1,0 mg / kg) e ondansetron (0,5 e 1,0 mg / kg) diminuíram significativamente os escores catalépticos (P <0,001) do que os grupos tratados com veículo em camundongos. Por outro lado, com doses de 2,0 mg / kg e 4,0 mg / kg, o EO apresentou pontua�es catal�ticas diminu�as significativamente (P <0,001) do que o grupo tratado com ve�ulo de uma maneira dependente da dose e do tempo. Nas doses 2,0 e 4,0mg / kg, o EO foi mais protetor contra a catalepsia induzida pelo haloperidol do que as drogas padrão.
Estudo crônico (Tabela / Fig 2)
Na fase crônica do estudo, a administração dos fármacos padrão e todas as doses do fármaco teste 30 min após a última dose de haloperidol no sétimo dia, deu escores catalépticos semelhantes (exceto ondansetran 1,0mg / kg e EO 4,0mg / kg) ao do grupo tratado com veículo. No entanto, 60 min após a administração de haloperidol, escopolamina (1,0 mg / kg), ondansetrona (0,5 e 1,0 mg / kg) e EO (0,8, 2,0 e 4,0 mg / kg) apresentaram escores catalépticos significativamente menores (P <0,001) do que grupo tratado com veículo de um modo dependente da dose e do tempo.
Atividade SOD
A atividade SOD (Tabela / Fig 3)no tecido cerebral também foi encontrado para ser elevado a partir dos valores normais (5,51) no grupo tratado com veículo (9,45). A redução máxima nos valores de SOD foi observada em OE a 4,0mg / kg (6,27) (P <0,01) do que o padrão de escopolamina 6,58 (P <0,01) e redução moderada foi observada em 0,8mg / kg (P <0,05) em comparação com valores normais de SOD. A atividade da SOD no encéfalo dos camundongos tratados com haloperidol e as drogas testadas são mostradas na Tabela 3. A atividade da SOD no encéfalo mostrou-se elevada no grupo tratado com haloperidol e o aumento observado foi cerca de 80% acima dos valores normais. .
Discussão
Os agentes neurolépticos típicos como clorpromazina, haloperidol e reserpina induzem um estado cataléptico em roedores e estes estão sendo usados como modos para testar os efeitos colaterais extrapiramidais envolvidos com ele. A catalepsia induzida por neurolépticos tem sido associada a um bloqueio dos receptores dopaminérgicos D1 e D2 do estriado pós-sináptico (20) . Apesar dessa evidência, vários outros neurotransmissores, como acetilcolina, serotonina, angiotensina, adenosina ou opioides, também foram implicados (21) . Além das implicações de vários neurotransmissores na catalepsia, muitos estudos pré-clínicos e clínicos propuseram espécies reativas de oxigênio na toxicidade induzida pelo haloperidol (22).. Evidências indicam que drogas que potenciam ou atenuam a catalepsia neuroléptica em roedores podem agravar ou reduzir os sinais extrapiramidais, respectivamente, em seres humanos (23) .No presente estudo, descobriu-se que a EO reduz efetivamente o HIC e é comparável àquela produzida pelos medicamentos padrão, escopolamina e ondansetrona. O efeito protetor do EO contra o HIC foi consistente com o nosso relatório anterior sobre os efeitos anticatalépticos de um produto poliarbal NR-ANX-C (15), em que EO é um dos componentes. OE foi encontrado para diminuir significativamente os níveis de SOD no cérebro de ratos; Isso sugere que ele mostra propriedades antioxidantes significativas no cérebro de ratos. Estudos neurofarmacológicos anteriores com OE em roedores sugeriram que ele tem propriedades anticolinérgicas e sedativas [7,24]. Investigações recentes mostraram que os princípios tanóides do EO compreendendo emblicanina A e B, punigluconina e pedunculagina, têm efeitos antioxidantes perse- guentes significativos no córtex frontal e estriado do cérebro de ratos (25).. A enzima superóxido dismutase (SOD) é um fator importante na toxicidade do oxigênio e a enzima SOD constitui uma defesa essencial contra ela. Na presença de um agente de extinção de radicais livres, a indução da enzima antioxidante é minimizada. Está bem estabelecido que a administração de haloperidol leva a um aumento do estresse oxidativo no tecido cerebral. O aumento da SOD observado no presente estudo suporta o conceito acima. Este estudo revela que os grupos tratados com OE reduzem significativamente (P <0,001) tanto o estresse oxidativo quanto o índice de catalepsia induzido pelo haloperidol.As frutas EO são uma rica fonte de vitamina C que foi responsável por suas principais ações biológicas, incluindo propriedades antioxidantes. No entanto, investigações mais recentes indicaram que a vitamina C sozinha não era responsável por seu potencial antioxidante (26) . Os efeitos anticataléticos do EO podem ser devidos tanto às suas propriedades anticolinérgicas quanto antioxidantes. Com base em nossos resultados, sugerimos que o OE possa ser usado como uma droga alternativa / adjuvante na prevenção e tratamento dos efeitos colaterais extrapiramidais de agentes antipsicóticos na prática clínica. Foi demonstrado que, além da vitamina C, outros polifenóis, como taninos e ácido gálico, podem contribuir para sua eficácia na redução do estresse oxidativo e da catalepsia. Outros estudos podem ajudar a elucidar os possíveis mecanismos de ação doEmblica officinalis .
Mensagem chave
Os neurolépticos (drogas antipsicóticas) são geralmente associados a efeitos colaterais extrapiramidais. Os ratos foram tratados com drogas padrão, como escopolamina ou anticolinérgicos de ação central; mas estes têm muitos efeitos colaterais como secura da boca, visão turva etc. Emblica officinalis é uma fruta comumente disponível na Índia. Foi a melhor alternativa para tratar os efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por neurolépticos.Reconhecimento
Senhora. Remédios Naturais Pvt. Ltd., Bangalore. Forneceu o medicamento de teste Emblica officinalisReferências1.. Seeman P, Corbett R, Nam D e Van Tol H H. Receptores de dopamina e serotonina: Sequências de aminoácidos e papel clínico no parkinsonismo neuroléptico. Jpn J Pharmacol 1996; 71: 187-204.2.. Casey D E. Discinesia tardia: fisiopatologia e modelos animais. J Clin Psychiat 2000; 61: 5-93.. Kulkarni SK, Naidu P. Discinesia tardia: uma atualização. Drogas de hoje 2001; 37: 97-119.4.. Silva SR e Futuro Neto HA & Pires JGP. Efeitos de antagonistas do receptor 5-HT3 na catalepsia induzida por neurolépticos em camundongos. Neuropharmacology 1995; 34: 97-99.5.. Pires JGP, Costa PG, Saraiva FP. Diferenças relacionadas ao gênero nos efeitos de doadores de óxido nítrico na catalepsia induzida por neurolépticos em camundongos. Revista Brasileira de Pesquisa Médica e Biológica 2003; 36: 239-245.6.. Rahul S.Somani, Veena S.Kasture, Sanjay B.Kasture. O haloperidol inibe as convulsões induzidas por (-) bicuculina e potencia os bicuculina em catalepsia induzida por haloperidol em ratinhos. Indian J Pharmacol 1999; 31: 434-436.7.. Klemm WR. Evidência de um papel colinérgico na catalepsia induzida pelo haloperidol. Psychopharmacology 1985; 85 (2): 139-142.8.. Jayashri S, Jolly CI. Investigações fitoquímicas, antibacterianas e farmacológicas em Mamordica chirantia e Emblica officinalis. Ind J Pharm Sci 1993; 1: 6-13.9.. Achilya GS, Wadodkar SG, Dorle AK. Avaliação do efeito hepatoprotetor de Emblica officinalis contra o dano hepático induzido por tetracloreto de carbono em ratos. J Ethnopharmacol 2004; 90 (2-3), 229-232.10.. Thakur CP, Mandal Kl Efeito da Emblica officinalis no colesterol induzido11.. aterosclerose em coelhos. J Med Res 1984; 79: 142-146.12.. Inder Singh, Dhanraj S e Pradeep Kumar Goel. O extrato de frutas Emblica officinalis (Linn) fornece proteção contra alterações hematológicas e bioquímicas induzidas por radiação em camundongos. J Environ Pathol Toxicol Oncol 2006; 25 (4): 643-654.13.. Khurana, SC; Gupta, SK; Sharma, RC; Arora, RB; Estudo das propriedades farmacodinâmicas de Emblica officinalis. Indian J Physiol Pharmacol 1970; 14:39.14.. Nadkarni AK, Nadkarni KM eds., Indian Materia Medica 3a edição Vol.I Popular Prakashan, Nova Delhi, 1992; 480-484.15.. Arunabh Bhattacharya, Shibnath Ghosal. Atividade antioxidante dos princípios taninos de Emblica officinalis (amla) no estresse crônico induziu mudanças no cérebro de ratos. Indian J Exp Biol 2000; 38: 877-880.16.. EUA Chakradhara Rao, M Lalith, HN Gopalakrishna. O efeito de NR-ANX-C (um produto polyherbal) em HIC. Indian J Physiol Pharmacol 2004; 48 (5): 108-109. 16. Ferre S, Guix T, Prat G. Jane F, Casas M. A catalepsia experimental é adequadamente medida? Pharmac Biochem Behav 1990; 35: 753-777.17.. Sudhakar Pemminati, V Nair, P. Dorababu, HN Gopalakrishna. Efeito do extrato etanólico de folhas de Ocimum sanctum na catalepsia induzida por haloperidol em camundongos albinos.18.. Indian J Pharmacol 2007; 39 (2): 87-89.19.. Beauchamp CO, I. Fridovich. Superóxido Dismutase: ensaio melhorado e um ensaio aplicável aos géis de acrilamida. Anal.Biochem 1971; 44: 276-287.20.. Peterson GL. Revisão do método de quantificação da proteína folina fenol de Lowry, Rosenbrough, Farr e Randall. Anal Biochem 1979; 100: 201-220.21.. A catalepsia induzida pelo haloperidol é mediada por receptores dopaminérgicos pós-sinápticos.Natureza1980; 284: 472-473.22.. Ossowska K. Neuronal base de efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por neurolépticos. Revista polonesa de farmacologia 2002; 54: 299-312.)23.. Polydoro M. Haloperidol e clozapina induziram estresse oxidativo no cérebro de ratos. Pharmacol Biochem Behav 2004; 78 (4): 751-6.24.. Marti-Masso JF, Poza JJ, Lopez de Munain A. Drogas indutoras ou agravantes do parkinsonismo. Therapie 1996; 51: 568-577.25.. Achliya GS, Wadodkar SG, Avinash KD. Ações neurofarmacológicas da formulação de panchagavya contendo Emblica officinalis Gaertn e Glycyrrhiza glabra Linn em camundongos. Indian J Exp Biol 2004; 42 (5): 499-503.26.. Bhattacharya A, Chatterjee A, Ghosal S, Bhattacharya SK. Atividade antioxidante dos princípios taninos ativos de Emblica officinalis. Indian J Exp Biol 1999; 37: 676.27.. Khopde, SMCaracterizando a atividade antioxidante do extrato de Amla (Phyl
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Abstrato
Os f�macos neurol�ticos utilizados no tratamento da esquizofrenia e outros dist�bios afectivos s� conhecidos por produzir efeitos colaterais extrapiramidais. A catalepsia foi induzida por estes fármacos em animais e estes foram utilizados como modelos para os efeitos colaterais extrapiramidais associados aos agentes antipsicóticos em seres humanos. No presente estudo, nós tentamos avaliar o efeito protetor do extrato aquoso dos frutos de Emblica officinalis (EO) na catalepsia induzida por haloperidol (1,0mg / kg intraperitoneal) em camundongos empregando o teste padrão de bar. Os ratos foram alocados em sete grupos, cada grupo contendo seis animais. Os efeitos da droga testada EO (0,8, 2,0 e 4,0mg / kg doses) e as drogas padrão escopolamina (1,0mg / kg) e ondansetron (0,5 e 1. Doses de 0 mg / kg) foram avaliadas após administração única e repetida da dose durante sete dias, 30 minutos antes do haloperidol. Os ratos foram sacrificados no sétimo dia e a atividade da superóxido dismutase (SOD) no tecido cerebral foi estimada usando o método de Beauchamp e Fridovich. Uma redução significativa (P <0,001) nos escores catalépticos foi observada em todos os grupos tratados com drogas de teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose de 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. Os ratos foram sacrificados no sétimo dia e a atividade da superóxido dismutase (SOD) no tecido cerebral foi estimada usando o método de Beauchamp e Fridovich. Uma redução significativa (P <0,001) nos escores catalépticos foi observada em todos os grupos tratados com drogas de teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose de 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. Os ratos foram sacrificados no sétimo dia e a atividade da superóxido dismutase (SOD) no tecido cerebral foi estimada usando o método de Beauchamp e Fridovich. Uma redução significativa (P <0,001) nos escores catalépticos foi observada em todos os grupos tratados com drogas de teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose de 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. 001) observou-se redução nos escores catalépticos em todos os grupos tratados com droga teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas. 001) observou-se redução nos escores catalépticos em todos os grupos tratados com droga teste em comparação com o controle, com redução máxima no grupo dose 4,0mg / kg. Da mesma forma, a redução máxima na atividade da SOD (P <0,01) foi observada no grupo dose de 4,0mg / kg. Nosso estudo sugere que o OE reduziu significativamente o estresse oxidativo e o escore cataléptico induzido pelo haloperidol. Pode ser usado para prevenir efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por drogas.Palavras-chave
Emblica officinalis, haloperidol, catalepsia
Como citar este artigo:
SUDHAKAR PEMMINATI, V NAIR, DORABABU P, GOPALAKRISHNA HN, PAI MRSM. EFEITO DO EXTRATO DE FRUTAS AQUOSAS DE EMBLICA OFFICINALIS SOBRE A CATALEPSIA INDUZIDA POR HALOPERIDOL EM CAMUNDONGOS ALBINO. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2009 agosto [citado: 2018 29 de agosto]; 3: 1657-1662. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2009&month=August&volume=3&issue=4&page=1657-1662&id=552
Introdução Osneurolépticos comumente usados no tratamento da esquizofrenia e de outros transtornos afetivos (1) são frequentemente associados a efeitos colaterais extrapiramidais angustiantes [2,3]. O fenômeno da imobilidade cataléptica induzida em roedores por neurolépticos típicos (por exemplo, haloperidol) é um modelo comportamental robusto para estudar a função nigrostriatal e sua modulação por sistemas colinérgicos, 5-hidroxitriptamina (5-HT, serotoninérgicos), nitrérgicos e outros neurotransmissores [4 5]. A catalepsia induzida por haloperidol (HIC) ocorre devido ao bloqueio dos receptores de dopamina (D2) e à redução da transmissão dopaminérgica (6).. A estimulação aumentada do sistema colinérgico central intrínseco também tem sido implicada na catalepsia induzida pelo haloperidol, uma vez que tem sido relatada a sua intensificação e antagonização por agonistas colinérgicos e pelo bloqueador, atropina, respectivamente (7) . Evidências também sugerem que o sistema serotoninérgico central modula a transmissão dopaminérgica nigrostriatal e os antagonistas de 5-HT3 são relatados para aliviar a catalepsia induzida por neurolépticos (4) . Assim, a escopolamina (um agente anticolinérgico conhecido) e o ondansetron (um conhecido antagonista de 5-HT3) foram utilizados como fármacos padrão neste estudo para comparar o efeito anticatalético do composto de teste, EO.Emblica officinalis Gaertn. ( Phyllanthus emblicaL.) pertence à família Euphorbiaceae, popularmente conhecida como Amla, que é um remédio familiar comum que encontra seu uso no sistema indígena indiano de medicina contra várias doenças. Tem sido relatado que seus frutos possuem atividades expectorante, purgativa, espasmolítica, antibacteriana, hipoglicêmica (8) , hepatoprotetora (9) e hipolipidêmica (10) . O extrato aquoso dos frutos de OE tem atividade citoprotetora contra a toxicidade induzida por radiação e metais pesados (11) . Também antagoniza as contrações induzidas por serotonina e acetilcolina do útero de rato estrogênio (12). Estas propriedades anticolinérgicas e antiserotonérgicas são importantes para o tratamento da catalepsia induzida por neurolépticos. As frutas EO contêm principalmente taninos e substâncias semelhantes à vitamina C em abundância e seus constituintes químicos incluem ácido gálico, ácido elágico, emblicanina A e B, punigluconina e alguns 10-12 flavanóides (13) . O extrato aquoso dos frutos de EO contém 30,0% de taninos e 10,0% de ácido gálico (a estimativa e a pureza do princípio ativo foram realizadas pelo Laboratório de Controle de Qualidade, M / s. Natural Remedies, Bangalore, laboratório nº0505211, dt.31- 05-2005). Estudos recentes sobre propriedade antioxiadante de frutos OE em cérebro de ratos; aumentando a superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPX) no cérebro de ratos; córtex frontal e estriado, concomitante com redução na peroxidação lipídica (LPO)(14) .
Em nosso laboratório, relatamos a atividade anticatalética de NR-ANX-C (um produto polialbárico) na catalepsia induzida por haloperidol em camundongos (15) . Emblica officinalis é um dos componentes do NR-ANX-C. A evidência das propriedades anticolinérgicas, antiserotonérgicas e antioxidantes do EO levou-nos a avaliar sua atividade anti-cataléptica.
Material e métodos
AnimaisCamundongos albinos machos adultos (pesando 25-30g), criados no biotério central do Kasturba Medical College, Mangalore, foram usados para o estudo. Os animais foram alojados sob ciclos padrão de 12 h: 12 h de luz / escuridão e foram fornecidos com comida e água ad libitum . Os animais foram aclimatados a condições de laboratório antes do teste. Cada animal foi usado uma vez. As experiências foram realizadas entre as 10:00 e as 16:00 horas. O protocolo experimental foi aprovado pelo Institutional Animal Ethics Committee e o estudo foi conduzido de acordo com as Diretrizes da Indian National Science Academy para o uso e cuidado de animais experimentais.Drogas e Dosagem
A droga de teste: o extrato aquoso dos frutos de Emblica officinalis(pó seco fornecido por Natural Remedies Pvt. Ltd., Bangalore). Os frutos frescos de OE foram coletados localmente após a devida identificação, foram secos ao ar, em pó e extraídos com água bidestilada. O extracto assim obtido foi evaporado em vácuo para se transformar em pó para ser redissolvido em água bidestilada. É um pó castanho a castanho muito escuro com um odor e sabor característicos e foi armazenado em recipientes hermeticamente fechados, protegidos da luz. A análise fitoquímica foi feita para taninos totais por um espectrofotômetro e o ácido gálico foi testado por HPLC.
Os fármacos padrão, escopolamina (German Remedies Ltd., Mumbai) e ondansetron (Cipla Ltd., Mumbai) foram suspensos / dissolvidos em solução de goma arábica a 1% enquanto o haloperidol (RPG Life Sciences Ltd., Bombaim) foi dissolvido em água destilada. Os tratamentos recebidos por cada grupo (cada grupo consiste em seis animais, n = 6) são mostrados na Tabela 1 e 2. O grupo recebeu 1% goma de acácia (10ml / kg) servido como controle. 1% de goma arábica, escopolamina (1,0mg / kg), ondansetron (0,5 e 1,0mg / kg) e OE (0,8, 2,0 e 4,0mg / kg) foram administrados por via oral, enquanto o haloperidol foi administrado intraperitonealmente.
Design experimental
Catalepsia Induzida por Haloperidol (HIC): A catalepsia foi induzida com haloperidol (1,0mg / kg ip) e foi avaliada em intervalos de 30 minutos até 120 minutos e ao final de 240 minutos por meio de um teste padrão de bar [16,17]. O haloperidol (1mg / kg ip) foi escolhido para que pudesse eliciar e, assim, possibilitar a detecção de atenuação ou potenciação do fenômeno (6).. A catalepsia foi avaliada em termos do tempo durante o qual o camundongo manteve uma posição imposta com ambos os membros dianteiros estendidos e apoiados em uma barra de madeira de 4 cm de altura (1,0 cm de diâmetro). O ponto final da catalepsia foi considerado quando ambas as patas dianteiras foram removidas da barra ou se o animal moveu a cabeça de forma exploratória. Um tempo de corte de 1100 segundos foi aplicado. Entre as determinações, os animais foram devolvidos às suas gaiolas individuais. Todas as observações foram feitas entre as 10:00 e as 16:00 horas, numa sala silenciosa, a 23-25º C.
Método de pontuação
Se o animal mantivesse a postura imposta por pelo menos 20 segundos, seria considerado cataléptico e receberia um ponto. Para cada 20 segundos adicionais para os quais a postura cataléptica foi mantida, um ponto extra seria dado. Os animais foram testados duas vezes em intervalos de 30 minutos e apenas a maior duração de imobilidade foi considerada (16) .
No estudo agudo, EO, escopolamina e ondansetrona foram administrados apenas 30 minutos antes da administração do haloperidol. No estudo crônico, essas drogas foram administradas uma vez ao dia, 30 minutos antes da administração do haloperidol por sete dias. A catalepsia foi determinada 30 min após a administração de haloperidol no primeiro e no sétimo dia de tratamento. Os animais foram então sacrificados por deslocamento cervical e a atividade da SOD de todo o tecido cerebral foi estimada pelo método de Beauchamp e Fridovich (18) .
Ensaio de SOD
O ensaio de SOD foi realizado, baseado na inibição, mediada pela SOD, da redução do nitroazul de tetrazólio à formação de azul por ânions de superóxido, como descrito por Beauchamp e Fridovich. A proteína total presente no homogenato foi estimada seguindo o método descrito por Lowry et al. (19) . As unidades de actividade de SOD determinadas, foram expressas em termos de miligramas de proteína total (TP). Os cérebros isolados dos grupos individuais de ratinhos foram homogeneizados (20% p / v) em tampão fosfato 10 mM pH 7,8. O homogenato foi submetido a centrifuga�o. Alíquota de 0,1 ml do homogeneizado (diluição 1:10) foi usada para o ensaio.
Análise estatística
Para cada grupo, a média ± SEM foi calculada e os dados foram analisados> por ANOVA de uma via, seguido pelo teste de Comparação Múltipla de Dunnet. Valores de p <0,05 foram considerados estatisticamente significantes.
Resultados
Estudo agudo (Tabela / Fig. 1)Na fase aguda do estudo, ao final de 30 minutos, não houve diminuição significativa nos escores catalépticos com os medicamentos padrão e o medicamento de teste. No entanto, a partir de 60 minutos após a administração de haloperidol, escopolamina (1,0 mg / kg) e ondansetron (0,5 e 1,0 mg / kg) diminuíram significativamente os escores catalépticos (P <0,001) do que os grupos tratados com veículo em camundongos. Por outro lado, com doses de 2,0 mg / kg e 4,0 mg / kg, o EO apresentou pontua�es catal�ticas diminu�as significativamente (P <0,001) do que o grupo tratado com ve�ulo de uma maneira dependente da dose e do tempo. Nas doses 2,0 e 4,0mg / kg, o EO foi mais protetor contra a catalepsia induzida pelo haloperidol do que as drogas padrão.Estudo crônico (Tabela / Fig 2)
Na fase crônica do estudo, a administração dos fármacos padrão e todas as doses do fármaco teste 30 min após a última dose de haloperidol no sétimo dia, deu escores catalépticos semelhantes (exceto ondansetran 1,0mg / kg e EO 4,0mg / kg) ao do grupo tratado com veículo. No entanto, 60 min após a administração de haloperidol, escopolamina (1,0 mg / kg), ondansetrona (0,5 e 1,0 mg / kg) e EO (0,8, 2,0 e 4,0 mg / kg) apresentaram escores catalépticos significativamente menores (P <0,001) do que grupo tratado com veículo de um modo dependente da dose e do tempo.
Atividade SOD
A atividade SOD (Tabela / Fig 3)no tecido cerebral também foi encontrado para ser elevado a partir dos valores normais (5,51) no grupo tratado com veículo (9,45). A redução máxima nos valores de SOD foi observada em OE a 4,0mg / kg (6,27) (P <0,01) do que o padrão de escopolamina 6,58 (P <0,01) e redução moderada foi observada em 0,8mg / kg (P <0,05) em comparação com valores normais de SOD. A atividade da SOD no encéfalo dos camundongos tratados com haloperidol e as drogas testadas são mostradas na Tabela 3. A atividade da SOD no encéfalo mostrou-se elevada no grupo tratado com haloperidol e o aumento observado foi cerca de 80% acima dos valores normais. .
Discussão
Os agentes neurolépticos típicos como clorpromazina, haloperidol e reserpina induzem um estado cataléptico em roedores e estes estão sendo usados como modos para testar os efeitos colaterais extrapiramidais envolvidos com ele. A catalepsia induzida por neurolépticos tem sido associada a um bloqueio dos receptores dopaminérgicos D1 e D2 do estriado pós-sináptico (20) . Apesar dessa evidência, vários outros neurotransmissores, como acetilcolina, serotonina, angiotensina, adenosina ou opioides, também foram implicados (21) . Além das implicações de vários neurotransmissores na catalepsia, muitos estudos pré-clínicos e clínicos propuseram espécies reativas de oxigênio na toxicidade induzida pelo haloperidol (22).. Evidências indicam que drogas que potenciam ou atenuam a catalepsia neuroléptica em roedores podem agravar ou reduzir os sinais extrapiramidais, respectivamente, em seres humanos (23) .No presente estudo, descobriu-se que a EO reduz efetivamente o HIC e é comparável àquela produzida pelos medicamentos padrão, escopolamina e ondansetrona. O efeito protetor do EO contra o HIC foi consistente com o nosso relatório anterior sobre os efeitos anticatalépticos de um produto poliarbal NR-ANX-C (15), em que EO é um dos componentes. OE foi encontrado para diminuir significativamente os níveis de SOD no cérebro de ratos; Isso sugere que ele mostra propriedades antioxidantes significativas no cérebro de ratos. Estudos neurofarmacológicos anteriores com OE em roedores sugeriram que ele tem propriedades anticolinérgicas e sedativas [7,24]. Investigações recentes mostraram que os princípios tanóides do EO compreendendo emblicanina A e B, punigluconina e pedunculagina, têm efeitos antioxidantes perse- guentes significativos no córtex frontal e estriado do cérebro de ratos (25).. A enzima superóxido dismutase (SOD) é um fator importante na toxicidade do oxigênio e a enzima SOD constitui uma defesa essencial contra ela. Na presença de um agente de extinção de radicais livres, a indução da enzima antioxidante é minimizada. Está bem estabelecido que a administração de haloperidol leva a um aumento do estresse oxidativo no tecido cerebral. O aumento da SOD observado no presente estudo suporta o conceito acima. Este estudo revela que os grupos tratados com OE reduzem significativamente (P <0,001) tanto o estresse oxidativo quanto o índice de catalepsia induzido pelo haloperidol.As frutas EO são uma rica fonte de vitamina C que foi responsável por suas principais ações biológicas, incluindo propriedades antioxidantes. No entanto, investigações mais recentes indicaram que a vitamina C sozinha não era responsável por seu potencial antioxidante (26) . Os efeitos anticataléticos do EO podem ser devidos tanto às suas propriedades anticolinérgicas quanto antioxidantes. Com base em nossos resultados, sugerimos que o OE possa ser usado como uma droga alternativa / adjuvante na prevenção e tratamento dos efeitos colaterais extrapiramidais de agentes antipsicóticos na prática clínica. Foi demonstrado que, além da vitamina C, outros polifenóis, como taninos e ácido gálico, podem contribuir para sua eficácia na redução do estresse oxidativo e da catalepsia. Outros estudos podem ajudar a elucidar os possíveis mecanismos de ação doEmblica officinalis .Mensagem chave
Os neurolépticos (drogas antipsicóticas) são geralmente associados a efeitos colaterais extrapiramidais. Os ratos foram tratados com drogas padrão, como escopolamina ou anticolinérgicos de ação central; mas estes têm muitos efeitos colaterais como secura da boca, visão turva etc. Emblica officinalis é uma fruta comumente disponível na Índia. Foi a melhor alternativa para tratar os efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por neurolépticos.ReconhecimentoSenhora. Remédios Naturais Pvt. Ltd., Bangalore. Forneceu o medicamento de teste Emblica officinalisReferências1.. Seeman P, Corbett R, Nam D e Van Tol H H. Receptores de dopamina e serotonina: Sequências de aminoácidos e papel clínico no parkinsonismo neuroléptico. Jpn J Pharmacol 1996; 71: 187-204.2.. Casey D E. Discinesia tardia: fisiopatologia e modelos animais. J Clin Psychiat 2000; 61: 5-93.. Kulkarni SK, Naidu P. Discinesia tardia: uma atualização. Drogas de hoje 2001; 37: 97-119.4.. Silva SR e Futuro Neto HA & Pires JGP. Efeitos de antagonistas do receptor 5-HT3 na catalepsia induzida por neurolépticos em camundongos. Neuropharmacology 1995; 34: 97-99.5.. Pires JGP, Costa PG, Saraiva FP. Diferenças relacionadas ao gênero nos efeitos de doadores de óxido nítrico na catalepsia induzida por neurolépticos em camundongos. Revista Brasileira de Pesquisa Médica e Biológica 2003; 36: 239-245.6.. Rahul S.Somani, Veena S.Kasture, Sanjay B.Kasture. O haloperidol inibe as convulsões induzidas por (-) bicuculina e potencia os bicuculina em catalepsia induzida por haloperidol em ratinhos. Indian J Pharmacol 1999; 31: 434-436.7.. Klemm WR. Evidência de um papel colinérgico na catalepsia induzida pelo haloperidol. Psychopharmacology 1985; 85 (2): 139-142.8.. Jayashri S, Jolly CI. Investigações fitoquímicas, antibacterianas e farmacológicas em Mamordica chirantia e Emblica officinalis. Ind J Pharm Sci 1993; 1: 6-13.9.. Achilya GS, Wadodkar SG, Dorle AK. Avaliação do efeito hepatoprotetor de Emblica officinalis contra o dano hepático induzido por tetracloreto de carbono em ratos. J Ethnopharmacol 2004; 90 (2-3), 229-232.10.. Thakur CP, Mandal Kl Efeito da Emblica officinalis no colesterol induzido11.. aterosclerose em coelhos. J Med Res 1984; 79: 142-146.12.. Inder Singh, Dhanraj S e Pradeep Kumar Goel. O extrato de frutas Emblica officinalis (Linn) fornece proteção contra alterações hematológicas e bioquímicas induzidas por radiação em camundongos. J Environ Pathol Toxicol Oncol 2006; 25 (4): 643-654.13.. Khurana, SC; Gupta, SK; Sharma, RC; Arora, RB; Estudo das propriedades farmacodinâmicas de Emblica officinalis. Indian J Physiol Pharmacol 1970; 14:39.14.. Nadkarni AK, Nadkarni KM eds., Indian Materia Medica 3a edição Vol.I Popular Prakashan, Nova Delhi, 1992; 480-484.15.. Arunabh Bhattacharya, Shibnath Ghosal. Atividade antioxidante dos princípios taninos de Emblica officinalis (amla) no estresse crônico induziu mudanças no cérebro de ratos. Indian J Exp Biol 2000; 38: 877-880.16.. EUA Chakradhara Rao, M Lalith, HN Gopalakrishna. O efeito de NR-ANX-C (um produto polyherbal) em HIC. Indian J Physiol Pharmacol 2004; 48 (5): 108-109. 16. Ferre S, Guix T, Prat G. Jane F, Casas M. A catalepsia experimental é adequadamente medida? Pharmac Biochem Behav 1990; 35: 753-777.17.. Sudhakar Pemminati, V Nair, P. Dorababu, HN Gopalakrishna. Efeito do extrato etanólico de folhas de Ocimum sanctum na catalepsia induzida por haloperidol em camundongos albinos.18.. Indian J Pharmacol 2007; 39 (2): 87-89.19.. Beauchamp CO, I. Fridovich. Superóxido Dismutase: ensaio melhorado e um ensaio aplicável aos géis de acrilamida. Anal.Biochem 1971; 44: 276-287.20.. Peterson GL. Revisão do método de quantificação da proteína folina fenol de Lowry, Rosenbrough, Farr e Randall. Anal Biochem 1979; 100: 201-220.21.. A catalepsia induzida pelo haloperidol é mediada por receptores dopaminérgicos pós-sinápticos.Natureza1980; 284: 472-473.22.. Ossowska K. Neuronal base de efeitos colaterais extrapiramidais induzidos por neurolépticos. Revista polonesa de farmacologia 2002; 54: 299-312.)23.. Polydoro M. Haloperidol e clozapina induziram estresse oxidativo no cérebro de ratos. Pharmacol Biochem Behav 2004; 78 (4): 751-6.24.. Marti-Masso JF, Poza JJ, Lopez de Munain A. Drogas indutoras ou agravantes do parkinsonismo. Therapie 1996; 51: 568-577.25.. Achliya GS, Wadodkar SG, Avinash KD. Ações neurofarmacológicas da formulação de panchagavya contendo Emblica officinalis Gaertn e Glycyrrhiza glabra Linn em camundongos. Indian J Exp Biol 2004; 42 (5): 499-503.26.. Bhattacharya A, Chatterjee A, Ghosal S, Bhattacharya SK. Atividade antioxidante dos princípios taninos ativos de Emblica officinalis. Indian J Exp Biol 1999; 37: 676.27.. Khopde, SMCaracterizando a atividade antioxidante do extrato de Amla (Phyl