Prevalência de Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina em Pacientes com Diabetes com Ulceras n image
AbstratoAntecedentes e Objetivos: A infecção por MRSA é comum em pacientes diabéticos com úlceras nos pés e está associada a tratamento prévio com antibióticos e cura prolongada. Como apenas alguns estudos com um pequeno número de amostras foram feitos a este respeito na Índia, o presente estudo foi realizado para relatar a prevalência e padrão de suscetibilidade a antibióticos de MRSA rastreados a partir de pacientes com diabetes com úlceras nos pés, freqüentando hospitais terciários.Configurações e Design: Foi um estudo retrospectivo realizado no Departamento de Microbiologia, Faculdade de Artes e Ciências Dr.NGP, Coimbatore, Tamil Nadu, Índia, durante o período de novembro de 2002 a outubro de 2006.Métodos:O presente estudo incluiu 7354 amostras de pus de pacientes com úlcera do pé diabético, coletadas de vários hospitais de atendimento terciário e em torno de Coimbatore. Todas as amostras foram submetidas a coloração de gram e cultura bacteriana, e os isolados de S. aureus foram selecionados para a prevalência de MRSA usando métodos microbiológicos convencionais. Posteriormente, o teste de sensibilidade a antibióticos foi realizado para os isolados de MRSA confirmados.
Resultados:Das 2314 (37,82%) cepas de S. aureus isoladas de úlceras do pé diabético, 992 (42,86%) foram consideradas resistentes à meticilina. Mais precisamente, todas as cepas de MRSA (100%) foram resistentes à penicilina, 90,92% à ampicilina, 82,76% ao clotrimoxazol, 64,11% à gentamicina, 60,08% à eritromicina, 51,91% à omnatax e 50,10% à cefalexina. Resistência multi-droga para cerca de 7 a 10 antibióticos foi observada entre 55,0% dos isolados. No entanto, todas as cepas foram sensíveis à vancomicina (100%).
Conclusões: A determinação da prevalência e do padrão de sensibilidade aos antibióticos do MRSA rastreados a partir de pacientes com úlcera do pé diabético ajudará o clínico para o tratamento de primeira linha em hospitais terciários.

Palavras-chave
Pacientes com diabetes, úlceras nos pés, MRSA, prevalência, multirresistente, S. aureus.
Como citar este artigo:
MURUGAN S, MANI KR, UMA DEVI P. PREVALÊNCIA DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTES A MEIICILINA ENTRE DIABETES COM PACIENTES COM ÚLCERAS DE PÉ E SEU PADRÃO DE SUSCETIBILIDADE ANTIMICROBIANA. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 agosto [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 979-984. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=August&volume=2&issue=4&page=979-984&id=306
Introdução Odiabetes afeta atualmente mais de 194 milhões de pessoas em todo o mundo, e estima-se que esse número atinja 333 milhões até 2025, com o ônus máximo recaído sobre os países em desenvolvimento. A Índia, considerada a “capital diabética do mundo”, sozinha, atualmente conta com mais de 35 milhões de pessoas portadoras de diabetes (1) . Estima-se que esse número chegue a 73,5 milhões até 2025, como conseqüência de maior expectativa de vida, estilo de vida sedentário e mudanças nos padrões alimentares (2) . Diabetes é um distúrbio crônico e afeta um grande segmento da população. Diabetes e problemas nos pés são quase síncronos (3). Estima-se que 25% dos diabéticos desenvolvam graves problemas nos pés em algum momento da vida, o que muitas vezes leva à amputação (4) . As infecções do pé diabético são mais graves e mais difíceis de tratar do que as infecções em não diabéticos. Os estafilococos e os estreptococos β-hemolíticos são os patógenos mais comumente isolados nas infecções moderadas e graves do pé diabético. Os cocos Gram-positivos aeróbicos são os microrganismos predominantes que colonizam e agudamente infectam as quebras na pele. (5) O gênero Staphylococcus inclui organismos patogênicos nos quais S. aureusé o mais importante que se tornou resistente à maioria dos agentes terapêuticos desenvolvidos nos últimos anos e, portanto, a quimioterapia antimicrobiana para essa espécie sempre foi empírica (6) . S. aureus é o patógeno mais importante nas infecções do pé diabético, mesmo quando não é o único isolado; geralmente é um componente de uma infecção mista (5) . O exemplo mais notável desse fenômeno foi o surgimento de Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), relatado apenas um ano após o lançamento da meticilina (7).. O uso excessivo de antibióticos e a seleção de agentes de espectro amplo, e não estreito, contribuíram para a alta prevalência de colonização por S. aureus resistente a meticilina (MRSA) em feridas de pé diabético. Muitos desses isolados de MRSA estão se tornando multirresistentes e são suscetíveis apenas aos antibióticos glicopeptídeos, como a vancomicina (8) . A resistência de baixo nível à vancomicina está emergindo atualmente (9) . S. aureus

resistente à meticilina(MRSA) tornou-se um problema de saúde pública considerável durante a última década, devido a um aumento significativo na incidência de MRSA isolado de pacientes com infecções complicadas, incluindo infecções do pé diabético de gravidade variável. Além disso, a cobertura empírica contra MRSA deve ser considerada em instituições com alta taxa de infecção por MRSA, ou em pacientes com risco aumentado de MRSA por meio de infecção prévia por MRSA, exposição a cursos anteriores de antibióticos, hospitalização recente ou internação domiciliar, ou por contato próximo com um paciente com MRSA. Portanto, o conhecimento da prevalência de MRSA e seu atual perfil antimicrobiano torna-se necessário na seleção do tratamento empírico adequado das infecções do pé diabético.
Material e métodosUm total de 7354 amostras de pus de pacientes com úlcera do pé diabético foram coletadas para S. aureustriagem. As amostras foram obtidas de vários hospitais de atendimento terciário em Coimbatore e Erode, de novembro de 2002 a outubro de 2006. Todas as amostras foram manuseadas e processadas assepticamente. Os morfotipos foram feitos para todas as amostras com base no método de coloração de Gram, para determinar o organismo que provavelmente estava presente. Posteriormente, os espécimes foram inoculados em placas de ágar sangue (BA) (aeróbio com 5% de CO2), ágar MacConkey (MA) e RCM (Robertson Cooked Meat medium) para posterior subcultivação e incubadas a 370C por 24 horas. As colônias de cocos Gram-positivos em aglomerados foram posteriormente confirmadas usando a tira bioquímica API-Staph (bioMeriux, França). Todas as cepas foram testadas para a produção da enzima coagulase livre usando o teste de coagulase em tubo, baseado em métodos padronizados (10).. Staphylococcus aureus ATCC 25923, um conhecido produtor de coagulase, foi incluído como uma estirpe de controlo.Todas as estirpes confirmadas de S. aureus foram subsequentemente testadas quanto à resistência à meticilina baseada no método de disco-difusão Kirby-Bauer, utilizando discos de oxacilina (10μg) obtidos da Hi-Media Laboratories Pvt Ltd. Os isolados foram considerados resistentes à meticilina, se a zona de inibição era de 10 mm ou menos. Além disso, o padrão de suscetibilidade a antibióticos do S. aureus resistente à meticilinafoi determinado no dia do seu isolamento pelo método de difusão de disco de Kirby-Bauer modificado em Mueller Hinton (MHA) Agar, usando os critérios de tamanhos de zona padrão de inibição para definir sensibilidade ou resistência a diferentes antimicrobianos. Os antibióticos utilizados foram penicilina-G (10 unidades); ampicilina (10); cloxacilina (30 g); cefalexina (30 µg); eritromicina (15); gentamicina (10); amicacina (30 g); ciprofloxacina (5 µg); ofloxacina (5); norfloxacina (10); cotrimoxazole (25); vancomicina (30 µg); linezolida (30 µg); netromicina (10 µg) e omnatax (5 µg). Finalmente, os dados foram registrados e analisados na conclusão do estudo, conforme recomendações do Clinical Laboratory Standards Institute (11) . S. aureus A ATCC 29213 foi utilizada como estirpe de referência para a padronização do teste de sensibilidade aos antibióticos.
ResultadosStaphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA)O estudo com padrão de resistência ao antibiograma em ágar Mueller-Hinton confirmou a presença de 992 MRSA de 2314 isolados de S. aureus obtidos de amostras de pus de pacientes diabéticos com úlceras nos pés. As restantes estirpes (1322) foram consideradas como S. aureus sensível à meticilina (MSSA). O presente estudo mostrou que 42,86% dos isolados de S. aureus eram MRSA. No entanto, todos os isolados foram sensíveis à vancomicina, o que determinou a importância do S. aureus resistente à vancomicina (VRSA), como vem sendo cada vez mais relatado (12).. Entre os 19 isolados de S. aureus, 8 (10,3%) eram resistentes à meticilina, em um estudo realizado em um hospital privado em Chennai (13) . É interessante notar que a prevalência de MRSA foi de 20,83% em Chennai entre os pacientes diabéticos (14) . Da mesma forma, em um estudo de 55 pacientes em Chennai, 66,6% de S. aureus foram encontrados para ser resistente à meticilina. A infecção de úlceras nos pés com MRSA foi associada à cicatrização retardada, comparada às úlceras infectadas com S. aureus sensível à meticilina (15) .Estudos anteriores descobriram que as infecções causadas por MRSA eram mais comuns entre pacientes que foram previamente tratados com antibióticos, do que naqueles que eram antibióticos ingênuos. No geral, as infecções por MRSA têm sido associadas a maior morbidade, maior permanência hospitalar e aumento de custos. No entanto, a literatura sobre o efeito na mortalidade tem sido mista. Quando se trata de infecções do pé diabético, a presença de MRSA pode levar a resultados mais desfavoráveis, aumento do risco de amputações, maior custo do tratamento e aumento da mortalidade (16) .

Neste estudo, de 7354 amostras de pus, 37,82% foram encontrados em isolados de S. aureus, dos quais MRSA e MSSA foram encontrados na ordem de 42,86% e 57,13%, respectivamente. A taxa de prevalência de S. aureus e MRSA isolada de amostras de pus foi comparada, como mostrado na (Tabela / Fig. 1) . Da mesma forma, a análise comparativa de isolados de MRSA e MSSA obtidos a partir de amostras de pus de úlceras do pé diabético é mostrada na (Tabela / Fig. 2) .

Padrão de Antibiograma para S. Aureus Resistente à Meticilina
Todas as cepas de 992 MRSA foram rastreadas de 2314 isolados de S. aureus,anteriormente isolados de amostras de pus exibiram diferentes padrões de resistência contra 16 antibióticos. Os diversos padrões de resistência a drogas de MRSA obtidos de úlceras do pé diabético são mostrados na (Tabela / Fig. 3)A porcentagem de resistência a antibióticos como penicilina, ampicilina, cotrimoxazol, gentamicina, eritromicina, cloxacilina, omnatax, cefalexina, ciprofloxacina, norfloxacina, amicacina, ofloxacina, netromicina, linezolida e vancomicina foi da ordem de 100%, 90,92. %, 82,76%, 64,11%, 60,08%, 52,11%, 51,91%, 50,10%, 48,08%, 43,75%, 43,24%, 39,99%, 35,88%, 12,90% e 0,00%, respectivamente. Mehta et al. relataram que a porcentagem de resistência a antibióticos como penicilina, tetraciclina, canamicina, estreptomicina, cloranfenicol e eritromicina é na ordem decrescente de 88,8%, 54,4%, 37,5%, 28,6%, 26,3% e 25%, respectivamente. No entanto, nenhuma cepa foi resistente a gentamicina e vancomicina. Cerca de 29.(8) . Os resultados do antibiograma neste estudo sugerem que os patógenos permanecem sensíveis a vários agentes. A vancomicina foi a droga mais eficaz contra o S. aureus. Esses achados são consistentes com estudos anteriores. Nenhum agente antimicrobiano isolado pode cobrir todos os possíveis organismos isolados de infecções do pé diabético. Nossos achados ilustram que a terapia antimicrobiana precisa ser selecionada, com base nos achados de cultura e nos padrões de sensibilidade antimicrobiana dos isolados.

Em um estudo sobre o espectro de resistência antimicrobiana entre MRSA, a resistência à ciprofloxacina foi tão alta quanto 90%, e Qureshi relatou o mesmo que 98,9% (7). Em contraste, observamos que 48,08% das cepas eram resistentes à ciprofloxacina e 39,91% eram resistentes à ofloxacina. No entanto, Pulimood observou apenas 8% de resistência de MRSA à gentamicina (5) contra 64,11% em nosso estudo. A resistência à gentamicina está em ascensão desde 1996, e um aumento da resistência à gentamicina de 0% antes de 1996 a 80% após 1996, foi relatado (17) . Qureshi et al. relataram uma resistência à gentamicina de 97,8%, o que é comparativamente superior ao atual estudo.

Padrão resistente a múltiplos fármacos de MRSA
O padrão multirresistente a fármacos para todos os isolados de MRSA é apresentado na (Tabela / Fig. 4), e descobriu-se que cerca de 55,0% dos isolados foram encontrados para ser resistente de 7 a 10 antibióticos, o que implica que um antibiótico alternativo é a necessidade da hora de combater a infecção por MRSA associada a úlceras do pé diabético. Embora a MRSA das úlceras do pé diabético tenha apresentado maior suscetibilidade a antibióticos individuais quando comparada a outras, obtivemos uma alta porcentagem de MRSA resistente a múltiplos medicamentos em pacientes com úlcera do pé diabético. O Majmuder de Assam relatou que 23,2% dos MRSA isolados de espécimes clínicos eram multirresistentes (18). Na Índia, o significado do MRSA foi reconhecido relativamente tarde, e surgiu como um problema nos anos 80 e 90. Nos últimos 15 anos, a disseminação mundial de muitos desses clones causou problemas terapêuticos importantes em muitos hospitais, assim como o desvio de recursos consideráveis para tentativas de controlar sua disseminação (19) . Neste estudo, todas as cepas apresentaram suscetibilidade à vancomicina e a maioria delas foi suscetível à linezolida. Como esperado, todas as cepas eram resistentes à penicilina, e a maioria delas era resistente à ampicilina. Mas a observação significativa e clinicamente relevante deste estudo é a resistência moderada mostrada por MRSA a outros antibióticos convencionais. Os outros relatos contemporâneos afirmam taxas mais altas de resistência para aminoglicosídeos e fluoroquinolonas.

Em conclusão, o grau de resistência ou sensibilidade do MRSA aos antibióticos comumente usados é reconhecido por ser diverso de região para região, e a vancomicina foi o único antibiótico encontrado a conferir sensibilidade uniforme (100%). Quando os antimicrobianos, incluindo a vancomicina, são considerados para tratamento, a escolha inevitavelmente requer a necessidade de testes in vitro de suscetibilidade de cada isolado de MRSA nos laboratórios clínicos. Nosso estudo é um prefácio para permitir que o epidemiologista entenda a natureza dos isolados de MRSA das úlceras do pé diabético nessa parte do sul da Índia.
Referências
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