Hemoglobinopatias em Dharwad, North Karnataka: um estudo baseado em hospitais
* Departamento de Bioquímica, SDMCollege de Ciências Médicas e Hospital, Dharwad, Karnataka. ** Atualmente trabalhando no Departamento de Bioquímica, Padre Muller Medical College, Mangalore, Karnataka. *** MBBS aluno da 2 ª fase, SDMCollege de Ciências Médicas e Hospital, Dharwad, Karnataka.
Endereço para correspondência :
Dr. Shivashankara AR, Departamento de Bioquímica, Padre Muller Medical College, Mangalore-575002. Karnataka. Telefone: 0824-2238255; 9880146133.
E-mail: arshiva@yahoo.comAbstrato
Os distúrbios hereditários da hemoglobina são responsáveis por uma série extremamente complexa de fenótipos clínicos. A anemia falciforme e a talassemia podem causar doenças crônicas e situações de risco de vida. O presente estudo foi realizado em Dharwad of North Karnataka. A prática de casamentos consangüíneos é um fenômeno sociocultural aceito na região. Este estudo foi de base hospitalar e os casos pediátricos de hemoglobinopatias foram identificados com base em dados clínicos, história familiar, índices de eritrócitos e eletroforese de hemoglobina. Dos cinquenta casos, vinte crianças eram portadoras de traço beta-talassêmico e quinze crianças sofriam de talassemia beta maior. Dois casos de traço falciforme e um caso isolado de heterozigoto composto para HbS / beta-talassemia também foram identificados. Famílias de quatro casos de hemoglobinopatias foram estudadas em detalhe para identificar os portadores de hemoglobinas anormais. Dez das cinquenta crianças do estudo eram produtos de acasalamento consangüíneo. A população de Dharwad parece ser um repositório da talassemia. Uma extensa triagem da população é necessária para avaliar a prevalência de hemoglobinopatias, o que ajudará na identificação dos portadores de hemoglobinopatias e na adoção de medidas terapêuticas e preventivas adequadas.Palavras-chaveHemoglobinas Anormais, Heterozigotos Compostos, Estudos de Família, Hemoglobinopatias, Eletroforese de Hemoglobina, Pedigree, Índices de Células Vermelhas, Traço de células falciformes, Talassemias
Como citar este artigo:
SHIVASHANKARA AR, JAILKHANI R, KINI A. HEMOGLOBINOPATHIES EM DHARWAD, NORTH KARNATAKA: UM ESTUDO BASEADO EM HOSPITAL. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 fevereiro [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 593-599. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=February&volume=2&issue=1&page=593-599&id=191
Os distúrbios hereditários da hemoglobina são os distúrbios mais comuns de um único gene no homem. Eles se dividem em três grupos sobrepostos: variantes estruturais; talassemias caracterizadas por taxa reduzida de síntese de uma ou mais cadeias de globina; e condições nas quais a síntese de hemoglobina fetal persiste além do período neonatal, coletivamente conhecida como persistência hereditária da hemoglobina fetal. Os distúrbios da hemoglobina são responsáveis por uma série extremamente complexa de fenótipos clínicos (1) .
A Organização Mundial de Saúde (OMS) sugeriu que cerca de 5% da população mundial são portadores de diferentes doenças hereditárias da hemoglobina (2). Os relatórios da OMS também afirmam que cerca de 370.000 homozigotos gravemente afetados ou heterozigotos compostos de talassemia são nascidos a cada ano. O UNICEF, em 1996, estimou que havia 29,7 milhões de portadores de beta-talassemia na Índia e cerca de 10.000 bebês com beta talassemia homozigota nascida a cada ano (3) . A incidência geral de traço talassêmico e hemoglobinopatias falciformes na Índia varia entre 3-17% e 1-44%, respectivamente (4) , (5) , (6) . Estima-se que existam cerca de 65.000 a 67.000 pacientes com talassemia beta na Índia, com cerca de 9.000 a 10.000 casos sendo adicionados a cada ano. A taxa de portadores do gene da beta-talassemia varia de 1 a 3% no sul da Índia a 3 a 15% no norte da Índia (7), (8) , (9) .
Nos países em desenvolvimento, nos quais há alta mortalidade por infecções e desnutrição no primeiro ano de vida, muitas das hemoglobinopatias não são reconhecidas.
A anemia falciforme e a talassemia major podem causar situações de risco de vida e doenças crônicas. Eles representam uma carga econômica e psicológica para o indivíduo afetado e sua família, e a sociedade como um todo. Portanto, a população precisa ser rastreada para a hemoglobina.
Material e métodos
Fonte dos dados:1. Crianças com anemia, fraqueza generalizada, febre e esplenomegalia, visitando o DPO pediátrico do hospital;2. Criança com anemia hemolítica grave, hepatoesplenomegalia e história de transfusão sanguínea, e internada na enfermaria pediátrica do hospital.
As crianças acima tinham entre 3 meses e 15 anos (n = 50) e foram encaminhadas aos departamentos de Bioquímica e Patologia para investigações laboratoriais de hemoglobinopatias.
Nosso protocolo de pesquisa foi aprovado pelo Comitê de Ética da instituição. Consentimento voluntário foi obtido dos sujeitos do estudo. Histórico familiar detalhado foi coletado dos pacientes / responsáveis em relação à história prévia de anemia hemolítica e transfusões de sangue, qualquer medicação tomada, consangüinidade nos casamentos e sinais e sintomas clínicos.história reprodutiva dos pais com relação a abortos, morte de qualquer criança, ainda o nascimento foi coletado.
Investigações laboratoriais: 5 ml. de sangue foi coletado em tubos de vácuo com EDTA como anticoagulante.
a) Parâmetros hematológicos: Hb, PCV, MCV, MCH, MCHC, contagem de glóbulos vermelhos e contagem de leucócitos foram medidos usando o contador de células Sysmex (10) . O esfregaço periférico foi avaliado quanto às características da morfologia dos eritrócitos(10) .
b) NESTROFT (teste de fragilidade osmótica eritrocitária em tubo único de olho nu) foi realizado para rastrear os casos de traço talassêmico beta (9) , (10) .
c) Electroforese de Hb: O hemolisado de glulos vermelhos foi diluo para ter uma concentrao de Hb de 10/10. A eletroforese foi realizada em pH alcalino de 8,6, em tiras de acetato de celulose, a 450V por 40 minutos. Após a corrida, as tiras foram coradas em Ponceau S. Interpretação do padrão de migração das amostras de teste foi realizada comparando-as com as de controlos conhecidos obtidos a partir de Helena Bioscienecs, Londres. A localização da HbF foi confirmada pela realização de eletroforese com sangue do cordão umbilical (10) , (11) .
d) Estimativa de HbA2: Após o ensaio de electroforese, as bandas de HbA2 e HbA foram eluídas da tira de celulose e as suas absorvências foram lidas a 415 nm, utilizando-se a percentagem de HbA2 (10) .
e) Estimativa de HbF: a% de HbF foi medida pelo método de desnaturação alcalina de Betke [10,11].
f) Teste de hemoglobinas instáveis: A estabilidade da Hb no isopropanol foi testada (11) .
g) Teste para HbS: testou-se a solubilidade da Hb desoxigenada em tamp� saponina-fosfato e depois calculou-se a% de HbS (10) , (11) .
ESTUDOS FAMILIARES:Estudos familiares de quatro pacientes com hemoglobinopatias foram realizados. Destes, dois eram casos de beta-talassemia major, um dos traços beta-talassêmicos, e um caso de heterozigoto composto de HbS / beta-talassemia. As amostras de sangue dos membros disponíveis da árvore genealógica foram coletadas e submetidas a investigações hematológicas e bioquímicas das hemoglobinopatias.
ANÁLISE DOS DADOS: O diagnóstico de hemoglobinopatias foi feito com base nos parâmetros hematológicos, exames laboratoriais e achados clínicos, conforme mencionado na literatura padrão [4,10,11]. Os valores dos parâmetros hematológicos foram expressos como média. Diagramas de pedigree foram elaborados com base nos estudos da família (12).
Resultados
Os resultados do presente estudo são apresentados na (Tabela / Fig. 1) , (Tabela / Fig. 2) , (Tabela / Fig. 3) , (Tabela / Fig. 4) , (Tabela / Fig. 5) , (Tabela / Fig. 6) ) e (Tabela / Fig 7) .Cinqüenta crianças com idade entre 3 meses e 15 anos, foram os sujeitos do nosso estudo. Eles eram casos suspeitos de hemoglobinopatias e encaminhados para investigações laboratoriais de hemoglobinopatias. Havia 15 crianças com beta talassemia major, 20 com traço de beta talassemia, duas com traço falciforme e um caso de heterozigoto composto de HbS / traço talassêmico beta. Dos cinquenta filhos, trinta e cinco eram do sexo masculino e quinze eram do sexo feminino. Do total de quinze casos de talassemia major, doze casos (80%) eram do sexo masculino e apenas três (20%) eram do sexo feminino. No caso de vinte crianças com traço talassêmico, treze (65%) eram do sexo masculino e sete (35%) do sexo feminino. Sete crianças apresentaram padrões normais de eletroforese de hemoglobina e nenhum dos parâmetros laboratoriais indicou qualquer hemoglobinopatia nos mesmos. Em cinco casos, os dados laboratoriais e clínicos foram insuficientes para confirmar o diagnóstico. O traço de beta-talassemia foi caracterizado pela média de Hb de 8,1 g%, média de MCV de 71fl, MCH médio de 21pg, valor de HbA2 de 8% e NESTROFT positivo. Nos casos principais com talassemia beta, a Hb foi de 5,5g%, a MCV foi de 62fl, a MCH foi de 18pg, a HbA2 de 3% e a HbF de 55%. Os casos principais da talassemia beta também foram caracterizados por anemia hipocrômica microcítica severa, anisocitose, poiquilocitose e alta porcentagem de células-alvo, como demonstrado pelo estudo de esfregaço de sangue periférico. Os casos de doença falciforme apresentaram teste de solubilidade positiva e valor de HbS de 25%. O MCV foi 62fl, o MCH foi 18pg, o HbA2 foi de 3% e o HbF 55%. Os casos principais da talassemia beta também foram caracterizados por anemia hipocrômica microcítica severa, anisocitose, poiquilocitose e alta porcentagem de células-alvo, como demonstrado pelo estudo de esfregaço de sangue periférico. Os casos de doença falciforme apresentaram teste de solubilidade positiva e valor de HbS de 25%. O MCV foi 62fl, o MCH foi 18pg, o HbA2 foi de 3% e o HbF 55%. Os casos principais da talassemia beta também foram caracterizados por anemia hipocrômica microcítica severa, anisocitose, poiquilocitose e alta porcentagem de células-alvo, como demonstrado pelo estudo de esfregaço de sangue periférico. Os casos de doença falciforme apresentaram teste de solubilidade positiva e valor de HbS de 25%.
No heterozigoto composto de HbS / beta-thalasemia, a HbS foi de 60% e este caso foi confirmado por estimativas de eletroforese, HbF e HbA2. Padrões eletroforéticos característicos foram observados em todos os casos confirmados de hemoglobinopatias.
De acordo com a história familiar coletada, 10 das 50 crianças de nosso estudo foram produtos de casamentos consangüíneos. Destes, seis eram beta-talassemia de crianças maiores, dois eram portadores de beta-talassemia e um era heterozigoto composto de HbS / beta-talassemia, e um era um caso não confirmado de hemoglobinopatia. Seis crianças talassêmicas tinham história de transfusões de sangue.
Discussão
As hemoglobinopatias são de ocorrência mundial, embora algumas áreas geográficas tenham alta prevalência desses distúrbios. Na Índia, a frequência média do gene da célula falciforme é de cerca de 5%. A maior freqüência do gene falciforme na Índia é relatada em Orissa (9%), seguida por Assam (8,3%), Madhya Pradesh (7,4%), Uttar Pradesh (7,1%), Tamil Nadu (7,1%) e Gujarat (6,4%). %) (8) , (9) , (10) . A distribuição da beta talassemia não é uniforme no subcontinente indiano. A frequência mais alta de traço de talassemia beta é relatada em Gujarat (10-15%), seguida por Sindh (10%), Punjab (6,5%), Tamil Nadu (8,4%) e Maharashtra (4) , (5) , (6 ) , (13) , (14), (15) , (16) , (17) .Na Índia, o problema das hemoglobinopatias é agravado pela heterogeneidade da população. As diferentes regiões da Índia têm diferentes frequências gênicas para as diversas hemoglobinopatias. As taxas de fertilidade, as taxas de alfabetização e as taxas de casamentos consangüíneos também são diversas. A parte norte de Karnataka, compreendendo os distritos de Dharwad, Gulbarga, Bidar, Belgam, Bijapur e Bellary, tem práticas sócio-culturais únicas. Consanguinidade nos casamentos é uma norma social bem aceita, independentemente da religião, casta, status educacional e fundo econômico. Nosso foi um estudo piloto realizado em Dharwad e foi hospitalar. Para os estudos familiares de quatro casos, visitamos as casas dos pacientes.
O diagnóstico das hemoglobinopatias foi feito utilizando os critérios mencionados na literatura padrão. 30% das crianças (participantes do estudo) foram vítimas de beta talassemia, 40% eram portadoras de beta talassemia, 4% (2) eram casos de traço falciforme e uma era heterozigoto composto de HbS / beta-talassemia. Em cinco casos, o diagnóstico não pôde ser confirmado, pois os dados clínicos e laboratoriais disponíveis eram insuficientes (Tabela / Fig. 2) . Estes poderiam ser os casos de talassemia alfa ou cadeias de fusão como a talassemia delta-beta, esta conclusão sendo baseada em achados hematológicos dados na literatura anterior (1) , (4) entretanto, o diagnóstico precisa ser confirmado com testes genéticos e cadeias de globina análise.
Poucos relatos da Índia estão disponíveis em relação à prevalência de heterozigotos compostos de talassemia (18) , (19) , (20) . De acordo com Garewal e Das (21) , a maioria dos pacientes com beta-talassemia são heterozigotos compostos que herdaram duas mutações diferentes, uma de cada mãe. A consangüinidade é conhecida por desempenhar um papel importante nas doenças hereditárias, particularmente em traços autossômicos recessivos. 20% (10 de 50) dos casos em nosso estudo eram descendentes de casamentos consangüíneos. Cinco crianças eram descendentes de acasalamento consanguíneo de terceiro grau (casamento entre tio e sobrinha, que é muito comum em North Karnataka), e cinco crianças eram descendentes de acasalamento consanguíneo de quarto grau (casamento entre primos de primeiro grau).(22) . Uma vez que indivíduos intimamente relacionados têm uma chance maior de portar os mesmos alelos do que indivíduos menos aparentados, as crianças de casamentos consangüíneos são mais freqüentemente homozigotas para vários alelos do que as crianças de casamentos não consangüíneos (22) . Devido à estrita prática de endogamia de castas e consangüinidade nos casamentos, a associação de talassemia com variantes estruturais da Hb, como E, C e S, é altamente prevalente na Índia (20).
Nós fizemos uma tentativa de fazer um estudo detalhado de talassem
Conclusão
A população de Hubli-Dharwad parece ser um repositório da talassemia. Planejamos realizar triagem extensiva da população para os distúrbios da hemoglobina, com o objetivo adicional de realizar a triagem neonatal regular e o diagnóstico pré-natal de hemoglobinopatias, o que ajudaria bastante no aconselhamento genético. As práticas socioculturais únicas de North Karnataka precisam ser exploradas por sua interação com fatores genéticos e seu papel na saúde humana.Reconhecimento
Os autores agradecem ao Conselho Indiano de Pesquisa Médica pela concessão de uma bolsa de pesquisa de curto prazo à Sra. Anitha Kini. Reconhecemos o apoio dos departamentos de pediatria e patologia, e incentivo dado por Dean e diretor médico do SDMCollege de Ciências Médicas e Hospital, Dharwad. Agradecemos aos pacientes e seus familiares pela cooperação durante o estudo. A ajuda técnica do Sr. Kumar e Guruswamy é reconhecida com gratidão.Referências1.DJ Weatherall, Clegg TB, Higgs DR, Wood WG. Hemoglobinopatias. Em: Scriver CR, Beaudet AL, WS Sly, Valle D (Eds.), Bases Metabólicas e Moleculares das Doenças Herdadas, 8ª Edição. Nova Iorque: McGraw Hill. 2001; 4571-4636.2.Angastinose M, Modell B. Epidemiologia global dos distúrbios da hemoglobina. Proc Natl Acad Sci USA 1998; 850: 251.3.UNICEF. O estado das crianças do mundo. Oxford: Oxford university Press, 1996; 2504.Balgir RS. O ônus das hemoglobinopatias na Índia e os desafios futuros. Curr Sci 2000; 79: 1536-1547.5.Balgir RS. A carga genética das hemoglobinopatias com referência especial à saúde da comunidade na Índia e os desafios futuros. Indian J Hematol Blood Transfus 2002; 20: 2-7.6.Balgir RS. Espectro de hemoglobinopatias no estado de Orissa, Índia: um estudo de coorte de dez anos. J Assoc Physicians India 2005; 53: 1021-1026.7.Yaish HM. Talassemia http://www.emedicine.com/PED/topic 2229.htm. Acessado em 23 de outubro de 2007.8.Verma IC, Choudhury VP, Jain PK. Prevenção da talassemia: uma necessidade na Índia. Indian J Pediatr 1992; 59: 649-654.9.Manglani M, Lokeshwar MR, Vani VG, Bhatia N, Mhaskar V. ‘ NESTROFT-an effective screening test for b-thalassemia trait. Indian Pediatr 1997; 34: 703 -708.
10.BJ selvagem, Bain BJ. Investigação de hemoglobinas anormais e talassemia. Em: Lewis SM, Bain BJ, Bates eu (Eds.), Dacie e Lewis prática hematologia, 9ª edição. Londres: Churchill Livingstone. 2001; 231-268.11.Fairbanks VF, Klee GG. Em: Burtis CA, Ashwood ER (Eds.), Tietz Livro de Texto de Química Clínica, 3a Edição. Filadélfia: WB Saunders.1998, 1678-1688.12.Connor JM, Ferguson-Smith MA. Genética Médica Essencial, 2ª Edição. Londres: ELBS. 1994, 118-127.13.Varawalla NY, Velha JM, Venkateshanz SR, Weatherall DJ. O espectro das mutações da beta-talassemia no subcontinente indiano, a base do diagnóstico pré-natal. Britânico
Endereço para correspondência :
Dr. Shivashankara AR, Departamento de Bioquímica, Padre Muller Medical College, Mangalore-575002. Karnataka. Telefone: 0824-2238255; 9880146133.
E-mail: arshiva@yahoo.comAbstrato
Os distúrbios hereditários da hemoglobina são responsáveis por uma série extremamente complexa de fenótipos clínicos. A anemia falciforme e a talassemia podem causar doenças crônicas e situações de risco de vida. O presente estudo foi realizado em Dharwad of North Karnataka. A prática de casamentos consangüíneos é um fenômeno sociocultural aceito na região. Este estudo foi de base hospitalar e os casos pediátricos de hemoglobinopatias foram identificados com base em dados clínicos, história familiar, índices de eritrócitos e eletroforese de hemoglobina. Dos cinquenta casos, vinte crianças eram portadoras de traço beta-talassêmico e quinze crianças sofriam de talassemia beta maior. Dois casos de traço falciforme e um caso isolado de heterozigoto composto para HbS / beta-talassemia também foram identificados. Famílias de quatro casos de hemoglobinopatias foram estudadas em detalhe para identificar os portadores de hemoglobinas anormais. Dez das cinquenta crianças do estudo eram produtos de acasalamento consangüíneo. A população de Dharwad parece ser um repositório da talassemia. Uma extensa triagem da população é necessária para avaliar a prevalência de hemoglobinopatias, o que ajudará na identificação dos portadores de hemoglobinopatias e na adoção de medidas terapêuticas e preventivas adequadas.Palavras-chaveHemoglobinas Anormais, Heterozigotos Compostos, Estudos de Família, Hemoglobinopatias, Eletroforese de Hemoglobina, Pedigree, Índices de Células Vermelhas, Traço de células falciformes, TalassemiasComo citar este artigo:
SHIVASHANKARA AR, JAILKHANI R, KINI A. HEMOGLOBINOPATHIES EM DHARWAD, NORTH KARNATAKA: UM ESTUDO BASEADO EM HOSPITAL. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 fevereiro [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 593-599. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=February&volume=2&issue=1&page=593-599&id=191
Os distúrbios hereditários da hemoglobina são os distúrbios mais comuns de um único gene no homem. Eles se dividem em três grupos sobrepostos: variantes estruturais; talassemias caracterizadas por taxa reduzida de síntese de uma ou mais cadeias de globina; e condições nas quais a síntese de hemoglobina fetal persiste além do período neonatal, coletivamente conhecida como persistência hereditária da hemoglobina fetal. Os distúrbios da hemoglobina são responsáveis por uma série extremamente complexa de fenótipos clínicos (1) .A Organização Mundial de Saúde (OMS) sugeriu que cerca de 5% da população mundial são portadores de diferentes doenças hereditárias da hemoglobina (2). Os relatórios da OMS também afirmam que cerca de 370.000 homozigotos gravemente afetados ou heterozigotos compostos de talassemia são nascidos a cada ano. O UNICEF, em 1996, estimou que havia 29,7 milhões de portadores de beta-talassemia na Índia e cerca de 10.000 bebês com beta talassemia homozigota nascida a cada ano (3) . A incidência geral de traço talassêmico e hemoglobinopatias falciformes na Índia varia entre 3-17% e 1-44%, respectivamente (4) , (5) , (6) . Estima-se que existam cerca de 65.000 a 67.000 pacientes com talassemia beta na Índia, com cerca de 9.000 a 10.000 casos sendo adicionados a cada ano. A taxa de portadores do gene da beta-talassemia varia de 1 a 3% no sul da Índia a 3 a 15% no norte da Índia (7), (8) , (9) .
Nos países em desenvolvimento, nos quais há alta mortalidade por infecções e desnutrição no primeiro ano de vida, muitas das hemoglobinopatias não são reconhecidas.
A anemia falciforme e a talassemia major podem causar situações de risco de vida e doenças crônicas. Eles representam uma carga econômica e psicológica para o indivíduo afetado e sua família, e a sociedade como um todo. Portanto, a população precisa ser rastreada para a hemoglobina.
Material e métodos
Fonte dos dados:1. Crianças com anemia, fraqueza generalizada, febre e esplenomegalia, visitando o DPO pediátrico do hospital;2. Criança com anemia hemolítica grave, hepatoesplenomegalia e história de transfusão sanguínea, e internada na enfermaria pediátrica do hospital.As crianças acima tinham entre 3 meses e 15 anos (n = 50) e foram encaminhadas aos departamentos de Bioquímica e Patologia para investigações laboratoriais de hemoglobinopatias.
Nosso protocolo de pesquisa foi aprovado pelo Comitê de Ética da instituição. Consentimento voluntário foi obtido dos sujeitos do estudo. Histórico familiar detalhado foi coletado dos pacientes / responsáveis em relação à história prévia de anemia hemolítica e transfusões de sangue, qualquer medicação tomada, consangüinidade nos casamentos e sinais e sintomas clínicos.história reprodutiva dos pais com relação a abortos, morte de qualquer criança, ainda o nascimento foi coletado.
Investigações laboratoriais: 5 ml. de sangue foi coletado em tubos de vácuo com EDTA como anticoagulante.
a) Parâmetros hematológicos: Hb, PCV, MCV, MCH, MCHC, contagem de glóbulos vermelhos e contagem de leucócitos foram medidos usando o contador de células Sysmex (10) . O esfregaço periférico foi avaliado quanto às características da morfologia dos eritrócitos(10) .
b) NESTROFT (teste de fragilidade osmótica eritrocitária em tubo único de olho nu) foi realizado para rastrear os casos de traço talassêmico beta (9) , (10) .
c) Electroforese de Hb: O hemolisado de glulos vermelhos foi diluo para ter uma concentrao de Hb de 10/10. A eletroforese foi realizada em pH alcalino de 8,6, em tiras de acetato de celulose, a 450V por 40 minutos. Após a corrida, as tiras foram coradas em Ponceau S. Interpretação do padrão de migração das amostras de teste foi realizada comparando-as com as de controlos conhecidos obtidos a partir de Helena Bioscienecs, Londres. A localização da HbF foi confirmada pela realização de eletroforese com sangue do cordão umbilical (10) , (11) .
d) Estimativa de HbA2: Após o ensaio de electroforese, as bandas de HbA2 e HbA foram eluídas da tira de celulose e as suas absorvências foram lidas a 415 nm, utilizando-se a percentagem de HbA2 (10) .
e) Estimativa de HbF: a% de HbF foi medida pelo método de desnaturação alcalina de Betke [10,11].
f) Teste de hemoglobinas instáveis: A estabilidade da Hb no isopropanol foi testada (11) .
g) Teste para HbS: testou-se a solubilidade da Hb desoxigenada em tamp� saponina-fosfato e depois calculou-se a% de HbS (10) , (11) .
ESTUDOS FAMILIARES:Estudos familiares de quatro pacientes com hemoglobinopatias foram realizados. Destes, dois eram casos de beta-talassemia major, um dos traços beta-talassêmicos, e um caso de heterozigoto composto de HbS / beta-talassemia. As amostras de sangue dos membros disponíveis da árvore genealógica foram coletadas e submetidas a investigações hematológicas e bioquímicas das hemoglobinopatias.
ANÁLISE DOS DADOS: O diagnóstico de hemoglobinopatias foi feito com base nos parâmetros hematológicos, exames laboratoriais e achados clínicos, conforme mencionado na literatura padrão [4,10,11]. Os valores dos parâmetros hematológicos foram expressos como média. Diagramas de pedigree foram elaborados com base nos estudos da família (12).
Resultados
Os resultados do presente estudo são apresentados na (Tabela / Fig. 1) , (Tabela / Fig. 2) , (Tabela / Fig. 3) , (Tabela / Fig. 4) , (Tabela / Fig. 5) , (Tabela / Fig. 6) ) e (Tabela / Fig 7) .Cinqüenta crianças com idade entre 3 meses e 15 anos, foram os sujeitos do nosso estudo. Eles eram casos suspeitos de hemoglobinopatias e encaminhados para investigações laboratoriais de hemoglobinopatias. Havia 15 crianças com beta talassemia major, 20 com traço de beta talassemia, duas com traço falciforme e um caso de heterozigoto composto de HbS / traço talassêmico beta. Dos cinquenta filhos, trinta e cinco eram do sexo masculino e quinze eram do sexo feminino. Do total de quinze casos de talassemia major, doze casos (80%) eram do sexo masculino e apenas três (20%) eram do sexo feminino. No caso de vinte crianças com traço talassêmico, treze (65%) eram do sexo masculino e sete (35%) do sexo feminino. Sete crianças apresentaram padrões normais de eletroforese de hemoglobina e nenhum dos parâmetros laboratoriais indicou qualquer hemoglobinopatia nos mesmos. Em cinco casos, os dados laboratoriais e clínicos foram insuficientes para confirmar o diagnóstico. O traço de beta-talassemia foi caracterizado pela média de Hb de 8,1 g%, média de MCV de 71fl, MCH médio de 21pg, valor de HbA2 de 8% e NESTROFT positivo. Nos casos principais com talassemia beta, a Hb foi de 5,5g%, a MCV foi de 62fl, a MCH foi de 18pg, a HbA2 de 3% e a HbF de 55%. Os casos principais da talassemia beta também foram caracterizados por anemia hipocrômica microcítica severa, anisocitose, poiquilocitose e alta porcentagem de células-alvo, como demonstrado pelo estudo de esfregaço de sangue periférico. Os casos de doença falciforme apresentaram teste de solubilidade positiva e valor de HbS de 25%. O MCV foi 62fl, o MCH foi 18pg, o HbA2 foi de 3% e o HbF 55%. Os casos principais da talassemia beta também foram caracterizados por anemia hipocrômica microcítica severa, anisocitose, poiquilocitose e alta porcentagem de células-alvo, como demonstrado pelo estudo de esfregaço de sangue periférico. Os casos de doença falciforme apresentaram teste de solubilidade positiva e valor de HbS de 25%. O MCV foi 62fl, o MCH foi 18pg, o HbA2 foi de 3% e o HbF 55%. Os casos principais da talassemia beta também foram caracterizados por anemia hipocrômica microcítica severa, anisocitose, poiquilocitose e alta porcentagem de células-alvo, como demonstrado pelo estudo de esfregaço de sangue periférico. Os casos de doença falciforme apresentaram teste de solubilidade positiva e valor de HbS de 25%.No heterozigoto composto de HbS / beta-thalasemia, a HbS foi de 60% e este caso foi confirmado por estimativas de eletroforese, HbF e HbA2. Padrões eletroforéticos característicos foram observados em todos os casos confirmados de hemoglobinopatias.
De acordo com a história familiar coletada, 10 das 50 crianças de nosso estudo foram produtos de casamentos consangüíneos. Destes, seis eram beta-talassemia de crianças maiores, dois eram portadores de beta-talassemia e um era heterozigoto composto de HbS / beta-talassemia, e um era um caso não confirmado de hemoglobinopatia. Seis crianças talassêmicas tinham história de transfusões de sangue.
Discussão
As hemoglobinopatias são de ocorrência mundial, embora algumas áreas geográficas tenham alta prevalência desses distúrbios. Na Índia, a frequência média do gene da célula falciforme é de cerca de 5%. A maior freqüência do gene falciforme na Índia é relatada em Orissa (9%), seguida por Assam (8,3%), Madhya Pradesh (7,4%), Uttar Pradesh (7,1%), Tamil Nadu (7,1%) e Gujarat (6,4%). %) (8) , (9) , (10) . A distribuição da beta talassemia não é uniforme no subcontinente indiano. A frequência mais alta de traço de talassemia beta é relatada em Gujarat (10-15%), seguida por Sindh (10%), Punjab (6,5%), Tamil Nadu (8,4%) e Maharashtra (4) , (5) , (6 ) , (13) , (14), (15) , (16) , (17) .Na Índia, o problema das hemoglobinopatias é agravado pela heterogeneidade da população. As diferentes regiões da Índia têm diferentes frequências gênicas para as diversas hemoglobinopatias. As taxas de fertilidade, as taxas de alfabetização e as taxas de casamentos consangüíneos também são diversas. A parte norte de Karnataka, compreendendo os distritos de Dharwad, Gulbarga, Bidar, Belgam, Bijapur e Bellary, tem práticas sócio-culturais únicas. Consanguinidade nos casamentos é uma norma social bem aceita, independentemente da religião, casta, status educacional e fundo econômico. Nosso foi um estudo piloto realizado em Dharwad e foi hospitalar. Para os estudos familiares de quatro casos, visitamos as casas dos pacientes.O diagnóstico das hemoglobinopatias foi feito utilizando os critérios mencionados na literatura padrão. 30% das crianças (participantes do estudo) foram vítimas de beta talassemia, 40% eram portadoras de beta talassemia, 4% (2) eram casos de traço falciforme e uma era heterozigoto composto de HbS / beta-talassemia. Em cinco casos, o diagnóstico não pôde ser confirmado, pois os dados clínicos e laboratoriais disponíveis eram insuficientes (Tabela / Fig. 2) . Estes poderiam ser os casos de talassemia alfa ou cadeias de fusão como a talassemia delta-beta, esta conclusão sendo baseada em achados hematológicos dados na literatura anterior (1) , (4) entretanto, o diagnóstico precisa ser confirmado com testes genéticos e cadeias de globina análise.
Poucos relatos da Índia estão disponíveis em relação à prevalência de heterozigotos compostos de talassemia (18) , (19) , (20) . De acordo com Garewal e Das (21) , a maioria dos pacientes com beta-talassemia são heterozigotos compostos que herdaram duas mutações diferentes, uma de cada mãe. A consangüinidade é conhecida por desempenhar um papel importante nas doenças hereditárias, particularmente em traços autossômicos recessivos. 20% (10 de 50) dos casos em nosso estudo eram descendentes de casamentos consangüíneos. Cinco crianças eram descendentes de acasalamento consanguíneo de terceiro grau (casamento entre tio e sobrinha, que é muito comum em North Karnataka), e cinco crianças eram descendentes de acasalamento consanguíneo de quarto grau (casamento entre primos de primeiro grau).(22) . Uma vez que indivíduos intimamente relacionados têm uma chance maior de portar os mesmos alelos do que indivíduos menos aparentados, as crianças de casamentos consangüíneos são mais freqüentemente homozigotas para vários alelos do que as crianças de casamentos não consangüíneos (22) . Devido à estrita prática de endogamia de castas e consangüinidade nos casamentos, a associação de talassemia com variantes estruturais da Hb, como E, C e S, é altamente prevalente na Índia (20).
Nós fizemos uma tentativa de fazer um estudo detalhado de talassem
Conclusão
A população de Hubli-Dharwad parece ser um repositório da talassemia. Planejamos realizar triagem extensiva da população para os distúrbios da hemoglobina, com o objetivo adicional de realizar a triagem neonatal regular e o diagnóstico pré-natal de hemoglobinopatias, o que ajudaria bastante no aconselhamento genético. As práticas socioculturais únicas de North Karnataka precisam ser exploradas por sua interação com fatores genéticos e seu papel na saúde humana.ReconhecimentoOs autores agradecem ao Conselho Indiano de Pesquisa Médica pela concessão de uma bolsa de pesquisa de curto prazo à Sra. Anitha Kini. Reconhecemos o apoio dos departamentos de pediatria e patologia, e incentivo dado por Dean e diretor médico do SDMCollege de Ciências Médicas e Hospital, Dharwad. Agradecemos aos pacientes e seus familiares pela cooperação durante o estudo. A ajuda técnica do Sr. Kumar e Guruswamy é reconhecida com gratidão.Referências1.DJ Weatherall, Clegg TB, Higgs DR, Wood WG. Hemoglobinopatias. Em: Scriver CR, Beaudet AL, WS Sly, Valle D (Eds.), Bases Metabólicas e Moleculares das Doenças Herdadas, 8ª Edição. Nova Iorque: McGraw Hill. 2001; 4571-4636.2.Angastinose M, Modell B. Epidemiologia global dos distúrbios da hemoglobina. Proc Natl Acad Sci USA 1998; 850: 251.3.UNICEF. O estado das crianças do mundo. Oxford: Oxford university Press, 1996; 2504.Balgir RS. O ônus das hemoglobinopatias na Índia e os desafios futuros. Curr Sci 2000; 79: 1536-1547.5.Balgir RS. A carga genética das hemoglobinopatias com referência especial à saúde da comunidade na Índia e os desafios futuros. Indian J Hematol Blood Transfus 2002; 20: 2-7.6.Balgir RS. Espectro de hemoglobinopatias no estado de Orissa, Índia: um estudo de coorte de dez anos. J Assoc Physicians India 2005; 53: 1021-1026.7.Yaish HM. Talassemia http://www.emedicine.com/PED/topic 2229.htm. Acessado em 23 de outubro de 2007.8.Verma IC, Choudhury VP, Jain PK. Prevenção da talassemia: uma necessidade na Índia. Indian J Pediatr 1992; 59: 649-654.9.Manglani M, Lokeshwar MR, Vani VG, Bhatia N, Mhaskar V. ‘ NESTROFT-an effective screening test for b-thalassemia trait. Indian Pediatr 1997; 34: 703 -708.10.BJ selvagem, Bain BJ. Investigação de hemoglobinas anormais e talassemia. Em: Lewis SM, Bain BJ, Bates eu (Eds.), Dacie e Lewis prática hematologia, 9ª edição. Londres: Churchill Livingstone. 2001; 231-268.11.Fairbanks VF, Klee GG. Em: Burtis CA, Ashwood ER (Eds.), Tietz Livro de Texto de Química Clínica, 3a Edição. Filadélfia: WB Saunders.1998, 1678-1688.12.Connor JM, Ferguson-Smith MA. Genética Médica Essencial, 2ª Edição. Londres: ELBS. 1994, 118-127.13.Varawalla NY, Velha JM, Venkateshanz SR, Weatherall DJ. O espectro das mutações da beta-talassemia no subcontinente indiano, a base do diagnóstico pré-natal. Britânico
