Papel do oxigênio reativo, intermediários do nitrogênio, e micro-organismos na prevenção de lesões r
Objetivo: O objetivo foi estudar os intermediários reativos de oxigênio (ROI) e intermediários reativos de nitrogênio (RNI) juntamente com a flora microbiológica em usuários de dispositivos intrauterinos antes e depois de sua inserção.
Estudo e desenho: Cinquenta e três mulheres que procuraram um dispositivo anticoncepcional intrauterino de cobre (DIU-Cu) foram incluídas no estudo. A flora microbiológica foi estudada a partir de aspirados endocervicais e uterinos, juntamente com intermediários reativos de oxigênio e nitrogênio, antes da inserção do DIU Cu, e subsequentemente em uma, quatro e 12 semanas, após a inserção. Vinte sujeitos também foram acompanhados em 24 semanas.
Resultados:Houve um aumento constante nos intermediários reativos de oxigênio em 1, 4 e 12 semanas, embora não tenha sido estatisticamente significante (p> 0,5). Por outro lado, houve diminuição nos níveis intermediários de nitrogênio reativo e L-citrulina, estatisticamente significante (p <0,5). O número de organismos cultivados em uma semana após a inserção foram mais do que aqueles presentes durante a pré-inserção, mas houve uma queda constante no número observado em quatro e 12 semanas. Os valores de RNI e ROI foram os mesmos em 24 semanas de acompanhamento como pré-inserção nos 20 indivíduos.
Conclusão:O equilíbrio entre os intermediários reativos de oxigênio e nitrogênio é talvez responsável pela ação de macrófagos ativados em diferentes organismos. A presença de microrganismos introduzidos no momento da inserção de um DIU causa um aumento nos níveis de ROI e uma queda nos níveis de RNI. A presença de cobre no DIU de cobre talvez melhore essas reações.
Palavras-chave
Dispositivo intra-uterino, intermediários reativos de nitrogênio, flora microbiológica.
Como citar este artigo:
GUPTA I, MAHAJAN, SAHA PK, DHAWAN, SETHI, SHARMA M, et al .. PAPEL DO OXIGÊNIO REATIVO, INTERMEDIATOS DE NITROGÊNIO E MICRO-ORGANISMOS NA PREVENÇÃO DE LESÕES RELACIONADAS AOS DISPOSITIVOS INTRA-UTERINOS DE COBRE. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 fevereiro [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 605-611. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=February&volume=2&issue=1&page=605-611&id=194
Em contraste com a crença anterior de que os dispositivos intrauterinos (DIU) estavam associados a um aumento na doença inflamatória pélvica (DIP) (1) , o DIU de cobre parece ter menos risco de desenvolver DIP. O cobre no DIU demonstrou ter alguma atividade bactericida. Mishell et al (2) encontraram uma diminuição na incidência de Gardnerella vaginalis em usuários de DIU de cobre. Fiscina et al (3) observaram inibição no crescimento de Neisseria gonorrhoea com concentração micromolar de cobre e relataram sobre a atividade bactericida do cobre in vitro. Elhag et al (4) mostraram o efeito inibitório do cobre em bactérias gram-positivas e lactobacilos. Kleinman et al (5)demonstraram que o crescimento de Chlamydia trachomatis poderia ser inibido em culturas de células endometriais humanas por íons de cobre, em concentrações de cobre conhecidas por serem liberadas pelo DIU de cobre. No entanto, o mecanismo exato de ação antimicrobiana do DIU de cobre não é conhecido.
O aumento no número de leucócitos polimorfonucleares no endométrio após a inserção do DIU foi documentado. (6) As células são ativadas por vários estímulos, como microrganismos opsonizados, fragmentos do complemento e oligopeptídeos de origem bacteriana N. formilados que são ativamente secretados ou liberados pela lise de organismos mortos (7) . Essas células inflamatórias ativadas liberam intermediários reativos de oxigênio (ROI) e intermediários reativos de nitrogênio (RNI) (8). Foi demonstrado que metais como ferro e cobre atuam como catalisadores no aumento da toxicidade dos intermediários reativos de oxigênio. Gupta et al (9) observaram que os níveis de cobre nos enxertos uterinos eram significativamente maiores em uma semana após a inserção. Da mesma forma, Nathan e Hibbs (10) também mostraram o efeito do RNI no controle da infecção e na interação do óxido nítrico com enzimas microbianas contendo proteínas ferro-sulfidrilas que poderiam ser responsáveis pela ação antimicrobiana. Os níveis de ROI e RNI foram estudados separadamente (11) , (12) e subsequentemente em conjunto (13) em usuários de DIU de cobre, mas nenhum estudo microbiológico realizado no presente estudo foi realizado, e o número de indivíduos estudados é maior, com maior tempo de seguimento.
Material e métodos
Os sujeitos do estudo incluíram mulheres que buscavam a inserção de DIU de Cu na clínica de planejamento familiar do departamento de Obstetrícia e Ginecologia, Microbiologia Médica, Medicina Experimental e Biotecnologia, Instituto de Pós-Graduação em Educação Médica e Pesquisa, Chandigarh, Índia, de fevereiro de 2001 a fevereiro de 2003. Após o exame de rotina e excluindo mulheres com infecção local e qualquer contraindicação para a inserção do DIU, foram retirados swabs do endocervix. Em seguida, o colo do útero e a vagina foram limpos com betadine e o aspirado uterino foi coletado. O DIU de cobre foi inserido na fase pós-menstrual imediata. Todos os indivíduos recrutados para o estudo foram acompanhados em uma, quatro e 12 semanas, e swabs cervicais e aspirado uterino foram coletados em cada consulta novamente, na fase pós-menstrual. Portanto, cada sujeito agia como seu próprio controle. Um consentimento informado por escrito foi retirado de cada paciente. O plano de trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética do Instituto. Em vinte indivíduos, os swabs endocervicais e o aspirado uterino foram coletados às 24 semanas também.Colec�o de amostras de zaragatoa cervical
Ap� limpeza e envolvimento antes de qualquer exame vaginal ter sido realizado, foram retirados zaragatoas do endoc�trix para exame de esfrega�o e cultura para organismos aer�icos e anaer�icos. Foram recolhidos esfregaços endocervicais para rastrear o seguinte:
- Chalamydia trachomatis
- Neisseria gonorrhea -
Streptococcus do grupo B
- Espécie de Staphylococcus
- Ureaplasma urealyticum
- Gardnerella vaginalis
- Organismos aeróbicos
O antigénio de Chlamydia trachomatis foi detectado nas células epiteliais endocervicais recolhidas com o esfregaço por ELISA , usando o kit Micro Track Syva empresa 3403 Verba Bnena Road, Sanjose CA-95-161-9013.
Dos três swabs do endocervix, um swab foi usado para detecção de células de pus, células epiteliais, organismos aeróbios e anaeróbicos e células de levedura, após coloração com coloração de Gram. O segundo esfregaço foi inoculado em meios de organismos semelhantes a pneumonia pleuro (PPLO) para detecção de micoplasma genital. O terceiro esfregaço foi inoculado em duas placas de ágar sangue de carneiro para detecção de organismos aeróbios e anaeróbicos. Os meios de comunicação da cidade de Nova York e o ágar de sangue humano foram usados para detectar Neisseria gonorréia e Gardnerella vaginalis, respectivamente. Diferentes organismos foram identificados de acordo com os métodos padrão (14) .
Coleta de aspirado uterino e isolamento de células
Depois de tomar as amostras endocervicais, a vagina e o colo do útero foram limpos e 5 ml de solução salina estéril normal foram instilados na cavidade uterina através de uma cânula de polietileno. Foi aspirado após um minuto e coletado em um tubo de centrífuga siliconizado. Isto foi seguido por inserção de DIU de cobre.
O aspirado foi centrifugado a 500 rpm durante 10 min a 4, para separar quaisquer detritos de tecido. O sobrenadante contendo células mononucleares foi separado por centrifugação em gradiente de densidade, utilizando uma coluna Ficoll isopaque. As células na interface, isto é, os monócitos e os linfócitos foram recolhidos num tubo separado e suspensos em 1 ml de meio essencial mínimo (MEM) (pH 7,2). Foi mantido por 2 horas a 30 ° C em atmosfera de 5% de CO2 e a viabilidade de monócitos foi verificada pelo teste de exclusão do azul de tripano (15). As células foram identificadas por coloração com esterase (16) .
Determinação de intermediários de azoto reactivos Os
monócitos na concentração de 1 x IO6 células / ml de MEM foram centrifugados a 1000 rpm a 4 ° C durante 10 min. O sobrenadante foi coletado e a determinação do nitrito foi realizada usando o reagente de Griess seguindo os métodos de Green et al (17) , e expressos como nmoles de células RNI / 106.
Estimativa de L-citrulina A
L-citrulina no aspirado uterino foi determinada pelo método colorimétrico de Boyde et al (18) e expressa em nmoles / 106 células.
Determinação de oxigênio reativo em
Resultados
Dos 53 indivíduos recrutados, 45 completaram todas as 4 visitas, e 20 indivíduos vieram para 24 semanas de acompanhamento também. Quarenta e nove sujeitos completaram uma semana após a inserção. O programa estatístico online (GraphPad Instat 3) foi utilizado para análise estatística.Valores de RNI e L-citrulina no aspirado uterino
Uma redução estatisticamente significativa nos valores de RNI e L-citrulina foi observada uma semana após a inserção, em comparação com os valores de pré-inserção (p <0,05). Uma tendência de declínio semelhante foi observada em quatro e 12 semanas, e a diminuição em todos os tempos foi estatisticamente significativa (p <0,05). No entanto, em 20 indivíduos nos quais as amostras foram coletadas em 24 semanas, os valores observados foram semelhantes ao valor de pré-inserção (Tabela / Fig. 1) e (Tabela / Fig. 2) .
Nível de ROI no aspirado uterino
O índice CL numa semana após a inserção foi superior ao valor de pré-inserção. No entanto, a diferença não foi estatisticamente significativa (p> 0,05). Uma tendência semelhante de aumento foi observada em quatro e 12 semanas, mas a diferença não foi estatisticamente significativa (p> 0,05). Estes valores às 24 semanas foram semelhantes aos valores observados antes da inserção do dispositivo (Tabela / Fig. 1) e (Tabela / Fig. 2) .
Estudos microbiológicos
Em todas as visitas (antes e depois da inserção de CuT), os microrganismos encontrados no esfregaço cervical, assim como no esfregaço do aspirado uterino, foram bacilos gram positivos e negativos, principalmente lacto bacilos, que é um comensal normal no sexo feminino. trato genital. Havia alguns cocos Gram-negativos e positivos também.
Seis indivíduos desenvolveram Gardnerella vaginalis na primeira visita. Um deles não veio para acompanhamento, como ela obteve o CuT removido no mesmo dia devido ao sangramento excessivo. Os outros cinco receberam tratamento quando chegaram uma semana após a inserção. Em três destes indivíduos, o esfregaço endocervical foi positivo para Gardnerella na visita de 4 semanas também, mas negativo nas amostras subsequentes. Três tiveram o crescimento em uma semana, dois no esfregaço cervical e um no esfregaço cervical e no aspirado uterino.
O número total de indivíduos com crescimento de organismos aumentou de uma semana de 29 para 32 no esfregaço cervical e de 13 para 15 no aspirado uterino, embora a maioria destes fossem comensais normais. Os mesmos sujeitos, quando acompanhados em um período de 4 semanas, mostraram que apenas 13 tinham crescimento de swab cervical e 3 indivíduos em aspirado uterino. Uma diminuição semelhante foi observada em 12 semanas, quando 7 tiveram o crescimento no esfregaço cervical e 2 no aspirado uterino. No entanto, a diminuição no número de indivíduos com crescimento de organismos quando comparados com aqueles que não tiveram crescimento, não foi encontrada estatisticamente significativa usando o teste de Mcnmars Chi-squre (p <0,05) tanto no esfregaço cervical quanto no aspirado uterino.
Muitos indivíduos que não tiveram crescimento na visita de pré-inserção (24 não tiveram crescimento no esfregaço cervical e 40 não tiveram crescimento no aspirado uterino), mostraram um crescimento de organismos nas amostras subsequentes cervicais e uterinas. No entanto, a diferença no número de indivíduos com crescimento em sua visita semanal de 1, 4 e 12 não foi estatisticamente significativa.
O número total de mulheres com crescimento em cada visita não mostrou qualquer tendência crescente significativa (Tabela / Fig. 3) e (Tabela / Fig. 4) .
Discussão
O DIU de cobre é um método contraceptivo eficaz, seguro e conveniente, e é um dos métodos populares de contracepção temporária usado atualmente. (1) A associação do IDP com o uso do DIU ainda é controversa. Moyer e Mishell mostraram que há um aumento no número de células polimorfonucleares em usuários de DIU. (6) No entanto, a inflamação local no endométrio após a inserção do DIU pode levar as células inflamatórias a liberar intermediários reativos de oxigênio e intermediários de nitrogênio, causando estresse oxidativo.No presente estudo, observamos um aumento constante e significativo nos níveis de índice CL em 4 e 12 semanas, indicando um aumento na produção de ROI neste momento. Nossos resultados estão de acordo com os de Amla et al. (11)Ao mesmo tempo, um declínio constante nos níveis de RNI foi observado em 1, 4 e 12 semanas, após a inserção. Anjalika et al (13) , que estudaram os níveis de RNI em usuários de DIU em Cu, também relataram resultados semelhantes. Os achados do presente estudo corroboram as observações feitas por esses dois grupos de trabalhadores. No entanto, também foi observado que os valores do índice CL e RNI às 24 semanas foram semelhantes aos valores observados pré-inserção. Isso corrobora os achados de Moyer et al (6) , que estudaram o endométrio em intervalos de até 5 anos após a inserção, e observaram que as alterações voltaram ao normal aos 6 meses.
A queda observada nos níveis de RNI pode ser devido a um aumento da inflamação local no endométrio devido à inserção de Cu DIU, bem como devido ao aumento no número de organismos após a inserção. Foi relatado que a explosão respiratória fagocitária com produção de ânion superóxido, é um componente crítico da defesa do hospedeiro contra a infecção. (20) As vias enzimáticas que conduzem à síntese de ROI e RNI são distintas e os produtos finais podem influenciar-se mutuamente. (21) O ânion superóxido então produzido, pode rapidamente inativar o óxido nítrico produzido pelas células. A outra maneira poderia ser pela ativação do cAMP, que diminui o cGMP, que forma a base da atividade do óxido nítrico. (22)
Essa observação de que a atividade antimicrobiana sinérgica resulta, talvez, da combinação do burst respiratório fagocítico e da interação da óxido nítrico sintase in vivo, é reforçada por nossos achados, que o aumento do crescimento de organismos, imediatamente após a inserção de Cu DIU, foi atenuado significativamente durante o período de 12 semanas pós-inserção. Timothy et al (23) e Mishell et al (2) relataram que o cobre aumenta a atividade microbicida de um DIU, mas não comentou o mecanismo. Em outro estudo, Gupta et al (9)demonstraram que há um aumento nos níveis de cobre no aspirado uterino, que está associado a um aumento nos níveis de ROI, após a inserção do DIU em Cu. Mediadores inorgânicos como ROI e RNI liberados pelas células inflamatórias ativadas, poderiam ser responsáveis pela ação microbicida do cobre no DIU.
A queda progressiva dos níveis de RNI, juntamente com uma diminuição no número de organismos, bem como um aumento concomitante nos níveis de ROI, como observado em nosso estudo, indicam o controle da infecção devido à ativação de macrófagos, levando a um cair nos níveis de RNI. O número de indivíduos cujos esfregaços cervicais / aspirado uterino mostraram crescimento de organismos, foi negativo para todos os organismos patogênicos, exceto um indivíduo que apresentou clamídia persistentemente em 12 e 24 semanas, e recebeu antibióticos. Além disso, embora 45,4% e 54,7% dos indivíduos tivessem culturas positivas para micoplasma e ureaplasma urealyticum, respectivamente, ambos os organismos foram encontrados em um número considerável de adultos com saúde sexualmente ativa, e todos esses assuntos
Estudo e desenho: Cinquenta e três mulheres que procuraram um dispositivo anticoncepcional intrauterino de cobre (DIU-Cu) foram incluídas no estudo. A flora microbiológica foi estudada a partir de aspirados endocervicais e uterinos, juntamente com intermediários reativos de oxigênio e nitrogênio, antes da inserção do DIU Cu, e subsequentemente em uma, quatro e 12 semanas, após a inserção. Vinte sujeitos também foram acompanhados em 24 semanas.
Resultados:Houve um aumento constante nos intermediários reativos de oxigênio em 1, 4 e 12 semanas, embora não tenha sido estatisticamente significante (p> 0,5). Por outro lado, houve diminuição nos níveis intermediários de nitrogênio reativo e L-citrulina, estatisticamente significante (p <0,5). O número de organismos cultivados em uma semana após a inserção foram mais do que aqueles presentes durante a pré-inserção, mas houve uma queda constante no número observado em quatro e 12 semanas. Os valores de RNI e ROI foram os mesmos em 24 semanas de acompanhamento como pré-inserção nos 20 indivíduos.
Conclusão:O equilíbrio entre os intermediários reativos de oxigênio e nitrogênio é talvez responsável pela ação de macrófagos ativados em diferentes organismos. A presença de microrganismos introduzidos no momento da inserção de um DIU causa um aumento nos níveis de ROI e uma queda nos níveis de RNI. A presença de cobre no DIU de cobre talvez melhore essas reações.
Palavras-chave
Dispositivo intra-uterino, intermediários reativos de nitrogênio, flora microbiológica.
Como citar este artigo:
GUPTA I, MAHAJAN, SAHA PK, DHAWAN, SETHI, SHARMA M, et al .. PAPEL DO OXIGÊNIO REATIVO, INTERMEDIATOS DE NITROGÊNIO E MICRO-ORGANISMOS NA PREVENÇÃO DE LESÕES RELACIONADAS AOS DISPOSITIVOS INTRA-UTERINOS DE COBRE. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2008 fevereiro [citado: 2018 28 de agosto]; 2: 605-611. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2008&month=February&volume=2&issue=1&page=605-611&id=194
Em contraste com a crença anterior de que os dispositivos intrauterinos (DIU) estavam associados a um aumento na doença inflamatória pélvica (DIP) (1) , o DIU de cobre parece ter menos risco de desenvolver DIP. O cobre no DIU demonstrou ter alguma atividade bactericida. Mishell et al (2) encontraram uma diminuição na incidência de Gardnerella vaginalis em usuários de DIU de cobre. Fiscina et al (3) observaram inibição no crescimento de Neisseria gonorrhoea com concentração micromolar de cobre e relataram sobre a atividade bactericida do cobre in vitro. Elhag et al (4) mostraram o efeito inibitório do cobre em bactérias gram-positivas e lactobacilos. Kleinman et al (5)demonstraram que o crescimento de Chlamydia trachomatis poderia ser inibido em culturas de células endometriais humanas por íons de cobre, em concentrações de cobre conhecidas por serem liberadas pelo DIU de cobre. No entanto, o mecanismo exato de ação antimicrobiana do DIU de cobre não é conhecido.O aumento no número de leucócitos polimorfonucleares no endométrio após a inserção do DIU foi documentado. (6) As células são ativadas por vários estímulos, como microrganismos opsonizados, fragmentos do complemento e oligopeptídeos de origem bacteriana N. formilados que são ativamente secretados ou liberados pela lise de organismos mortos (7) . Essas células inflamatórias ativadas liberam intermediários reativos de oxigênio (ROI) e intermediários reativos de nitrogênio (RNI) (8). Foi demonstrado que metais como ferro e cobre atuam como catalisadores no aumento da toxicidade dos intermediários reativos de oxigênio. Gupta et al (9) observaram que os níveis de cobre nos enxertos uterinos eram significativamente maiores em uma semana após a inserção. Da mesma forma, Nathan e Hibbs (10) também mostraram o efeito do RNI no controle da infecção e na interação do óxido nítrico com enzimas microbianas contendo proteínas ferro-sulfidrilas que poderiam ser responsáveis pela ação antimicrobiana. Os níveis de ROI e RNI foram estudados separadamente (11) , (12) e subsequentemente em conjunto (13) em usuários de DIU de cobre, mas nenhum estudo microbiológico realizado no presente estudo foi realizado, e o número de indivíduos estudados é maior, com maior tempo de seguimento.
Material e métodos
Os sujeitos do estudo incluíram mulheres que buscavam a inserção de DIU de Cu na clínica de planejamento familiar do departamento de Obstetrícia e Ginecologia, Microbiologia Médica, Medicina Experimental e Biotecnologia, Instituto de Pós-Graduação em Educação Médica e Pesquisa, Chandigarh, Índia, de fevereiro de 2001 a fevereiro de 2003. Após o exame de rotina e excluindo mulheres com infecção local e qualquer contraindicação para a inserção do DIU, foram retirados swabs do endocervix. Em seguida, o colo do útero e a vagina foram limpos com betadine e o aspirado uterino foi coletado. O DIU de cobre foi inserido na fase pós-menstrual imediata. Todos os indivíduos recrutados para o estudo foram acompanhados em uma, quatro e 12 semanas, e swabs cervicais e aspirado uterino foram coletados em cada consulta novamente, na fase pós-menstrual. Portanto, cada sujeito agia como seu próprio controle. Um consentimento informado por escrito foi retirado de cada paciente. O plano de trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética do Instituto. Em vinte indivíduos, os swabs endocervicais e o aspirado uterino foram coletados às 24 semanas também.Colec�o de amostras de zaragatoa cervicalAp� limpeza e envolvimento antes de qualquer exame vaginal ter sido realizado, foram retirados zaragatoas do endoc�trix para exame de esfrega�o e cultura para organismos aer�icos e anaer�icos. Foram recolhidos esfregaços endocervicais para rastrear o seguinte:
- Chalamydia trachomatis
- Neisseria gonorrhea -
Streptococcus do grupo B
- Espécie de Staphylococcus
- Ureaplasma urealyticum
- Gardnerella vaginalis
- Organismos aeróbicos
O antigénio de Chlamydia trachomatis foi detectado nas células epiteliais endocervicais recolhidas com o esfregaço por ELISA , usando o kit Micro Track Syva empresa 3403 Verba Bnena Road, Sanjose CA-95-161-9013.
Dos três swabs do endocervix, um swab foi usado para detecção de células de pus, células epiteliais, organismos aeróbios e anaeróbicos e células de levedura, após coloração com coloração de Gram. O segundo esfregaço foi inoculado em meios de organismos semelhantes a pneumonia pleuro (PPLO) para detecção de micoplasma genital. O terceiro esfregaço foi inoculado em duas placas de ágar sangue de carneiro para detecção de organismos aeróbios e anaeróbicos. Os meios de comunicação da cidade de Nova York e o ágar de sangue humano foram usados para detectar Neisseria gonorréia e Gardnerella vaginalis, respectivamente. Diferentes organismos foram identificados de acordo com os métodos padrão (14) .
Coleta de aspirado uterino e isolamento de células
Depois de tomar as amostras endocervicais, a vagina e o colo do útero foram limpos e 5 ml de solução salina estéril normal foram instilados na cavidade uterina através de uma cânula de polietileno. Foi aspirado após um minuto e coletado em um tubo de centrífuga siliconizado. Isto foi seguido por inserção de DIU de cobre.
O aspirado foi centrifugado a 500 rpm durante 10 min a 4, para separar quaisquer detritos de tecido. O sobrenadante contendo células mononucleares foi separado por centrifugação em gradiente de densidade, utilizando uma coluna Ficoll isopaque. As células na interface, isto é, os monócitos e os linfócitos foram recolhidos num tubo separado e suspensos em 1 ml de meio essencial mínimo (MEM) (pH 7,2). Foi mantido por 2 horas a 30 ° C em atmosfera de 5% de CO2 e a viabilidade de monócitos foi verificada pelo teste de exclusão do azul de tripano (15). As células foram identificadas por coloração com esterase (16) .
Determinação de intermediários de azoto reactivos Os
monócitos na concentração de 1 x IO6 células / ml de MEM foram centrifugados a 1000 rpm a 4 ° C durante 10 min. O sobrenadante foi coletado e a determinação do nitrito foi realizada usando o reagente de Griess seguindo os métodos de Green et al (17) , e expressos como nmoles de células RNI / 106.
Estimativa de L-citrulina A
L-citrulina no aspirado uterino foi determinada pelo método colorimétrico de Boyde et al (18) e expressa em nmoles / 106 células.
Determinação de oxigênio reativo em
Resultados
Dos 53 indivíduos recrutados, 45 completaram todas as 4 visitas, e 20 indivíduos vieram para 24 semanas de acompanhamento também. Quarenta e nove sujeitos completaram uma semana após a inserção. O programa estatístico online (GraphPad Instat 3) foi utilizado para análise estatística.Valores de RNI e L-citrulina no aspirado uterinoUma redução estatisticamente significativa nos valores de RNI e L-citrulina foi observada uma semana após a inserção, em comparação com os valores de pré-inserção (p <0,05). Uma tendência de declínio semelhante foi observada em quatro e 12 semanas, e a diminuição em todos os tempos foi estatisticamente significativa (p <0,05). No entanto, em 20 indivíduos nos quais as amostras foram coletadas em 24 semanas, os valores observados foram semelhantes ao valor de pré-inserção (Tabela / Fig. 1) e (Tabela / Fig. 2) .
Nível de ROI no aspirado uterino
O índice CL numa semana após a inserção foi superior ao valor de pré-inserção. No entanto, a diferença não foi estatisticamente significativa (p> 0,05). Uma tendência semelhante de aumento foi observada em quatro e 12 semanas, mas a diferença não foi estatisticamente significativa (p> 0,05). Estes valores às 24 semanas foram semelhantes aos valores observados antes da inserção do dispositivo (Tabela / Fig. 1) e (Tabela / Fig. 2) .
Estudos microbiológicos
Em todas as visitas (antes e depois da inserção de CuT), os microrganismos encontrados no esfregaço cervical, assim como no esfregaço do aspirado uterino, foram bacilos gram positivos e negativos, principalmente lacto bacilos, que é um comensal normal no sexo feminino. trato genital. Havia alguns cocos Gram-negativos e positivos também.
Seis indivíduos desenvolveram Gardnerella vaginalis na primeira visita. Um deles não veio para acompanhamento, como ela obteve o CuT removido no mesmo dia devido ao sangramento excessivo. Os outros cinco receberam tratamento quando chegaram uma semana após a inserção. Em três destes indivíduos, o esfregaço endocervical foi positivo para Gardnerella na visita de 4 semanas também, mas negativo nas amostras subsequentes. Três tiveram o crescimento em uma semana, dois no esfregaço cervical e um no esfregaço cervical e no aspirado uterino.
O número total de indivíduos com crescimento de organismos aumentou de uma semana de 29 para 32 no esfregaço cervical e de 13 para 15 no aspirado uterino, embora a maioria destes fossem comensais normais. Os mesmos sujeitos, quando acompanhados em um período de 4 semanas, mostraram que apenas 13 tinham crescimento de swab cervical e 3 indivíduos em aspirado uterino. Uma diminuição semelhante foi observada em 12 semanas, quando 7 tiveram o crescimento no esfregaço cervical e 2 no aspirado uterino. No entanto, a diminuição no número de indivíduos com crescimento de organismos quando comparados com aqueles que não tiveram crescimento, não foi encontrada estatisticamente significativa usando o teste de Mcnmars Chi-squre (p <0,05) tanto no esfregaço cervical quanto no aspirado uterino.
Muitos indivíduos que não tiveram crescimento na visita de pré-inserção (24 não tiveram crescimento no esfregaço cervical e 40 não tiveram crescimento no aspirado uterino), mostraram um crescimento de organismos nas amostras subsequentes cervicais e uterinas. No entanto, a diferença no número de indivíduos com crescimento em sua visita semanal de 1, 4 e 12 não foi estatisticamente significativa.
O número total de mulheres com crescimento em cada visita não mostrou qualquer tendência crescente significativa (Tabela / Fig. 3) e (Tabela / Fig. 4) .
Discussão
O DIU de cobre é um método contraceptivo eficaz, seguro e conveniente, e é um dos métodos populares de contracepção temporária usado atualmente. (1) A associação do IDP com o uso do DIU ainda é controversa. Moyer e Mishell mostraram que há um aumento no número de células polimorfonucleares em usuários de DIU. (6) No entanto, a inflamação local no endométrio após a inserção do DIU pode levar as células inflamatórias a liberar intermediários reativos de oxigênio e intermediários de nitrogênio, causando estresse oxidativo.No presente estudo, observamos um aumento constante e significativo nos níveis de índice CL em 4 e 12 semanas, indicando um aumento na produção de ROI neste momento. Nossos resultados estão de acordo com os de Amla et al. (11)Ao mesmo tempo, um declínio constante nos níveis de RNI foi observado em 1, 4 e 12 semanas, após a inserção. Anjalika et al (13) , que estudaram os níveis de RNI em usuários de DIU em Cu, também relataram resultados semelhantes. Os achados do presente estudo corroboram as observações feitas por esses dois grupos de trabalhadores. No entanto, também foi observado que os valores do índice CL e RNI às 24 semanas foram semelhantes aos valores observados pré-inserção. Isso corrobora os achados de Moyer et al (6) , que estudaram o endométrio em intervalos de até 5 anos após a inserção, e observaram que as alterações voltaram ao normal aos 6 meses.A queda observada nos níveis de RNI pode ser devido a um aumento da inflamação local no endométrio devido à inserção de Cu DIU, bem como devido ao aumento no número de organismos após a inserção. Foi relatado que a explosão respiratória fagocitária com produção de ânion superóxido, é um componente crítico da defesa do hospedeiro contra a infecção. (20) As vias enzimáticas que conduzem à síntese de ROI e RNI são distintas e os produtos finais podem influenciar-se mutuamente. (21) O ânion superóxido então produzido, pode rapidamente inativar o óxido nítrico produzido pelas células. A outra maneira poderia ser pela ativação do cAMP, que diminui o cGMP, que forma a base da atividade do óxido nítrico. (22)
Essa observação de que a atividade antimicrobiana sinérgica resulta, talvez, da combinação do burst respiratório fagocítico e da interação da óxido nítrico sintase in vivo, é reforçada por nossos achados, que o aumento do crescimento de organismos, imediatamente após a inserção de Cu DIU, foi atenuado significativamente durante o período de 12 semanas pós-inserção. Timothy et al (23) e Mishell et al (2) relataram que o cobre aumenta a atividade microbicida de um DIU, mas não comentou o mecanismo. Em outro estudo, Gupta et al (9)demonstraram que há um aumento nos níveis de cobre no aspirado uterino, que está associado a um aumento nos níveis de ROI, após a inserção do DIU em Cu. Mediadores inorgânicos como ROI e RNI liberados pelas células inflamatórias ativadas, poderiam ser responsáveis pela ação microbicida do cobre no DIU.
A queda progressiva dos níveis de RNI, juntamente com uma diminuição no número de organismos, bem como um aumento concomitante nos níveis de ROI, como observado em nosso estudo, indicam o controle da infecção devido à ativação de macrófagos, levando a um cair nos níveis de RNI. O número de indivíduos cujos esfregaços cervicais / aspirado uterino mostraram crescimento de organismos, foi negativo para todos os organismos patogênicos, exceto um indivíduo que apresentou clamídia persistentemente em 12 e 24 semanas, e recebeu antibióticos. Além disso, embora 45,4% e 54,7% dos indivíduos tivessem culturas positivas para micoplasma e ureaplasma urealyticum, respectivamente, ambos os organismos foram encontrados em um número considerável de adultos com saúde sexualmente ativa, e todos esses assuntos
